附件6：
體(ti)外診斷試劑生(sheng)產及質量控制技(ji)術指(zhi)導原(yuan)則
——生(sheng)物(wu)芯片類試(shi)劑(ji)生(sheng)產及質量控制(zhi)技術指導原則
（征求意見稿）
前 言
本指導原則所定義的(de)生物(wu)芯(xin)片(pian)診(zhen)斷試劑是指將多個生物(wu)探針（包(bao)括DNA片(pian)段，寡核(he)苷酸、抗(kang)原、抗(kang)體，組織，細胞等）按預先設計的(de)排列方式固(gu)定在特(te)制的(de)基質（包(bao)括玻璃(li)片(pian)，尼龍膜，硝(xiao)酸纖維素膜等）上(shang)，用特(te)定的(de)方法提取生物(wu)靶(ba)分(fen)子并進(jin)行標記，然后與固(gu)定在基質上(shang)的(de)生物(wu)探針特(te)異性(xing)(xing)的(de)結合，再用相應的(de)檢(jian)測設備（如激光掃描(miao)儀、CCD檢(jian)測儀等）和分(fen)析方法（包(bao)括軟件）進(jin)行檢(jian)測、記錄、分(fen)析，實(shi)現對生物(wu)靶(ba)分(fen)子的(de)定性(xing)(xing)或(huo)定量(liang)檢(jian)測的(de)試劑。
根(gen)據芯(xin)片(pian)(pian)制(zhi)作的主要原(yuan)料和方法(fa)，生(sheng)物芯(xin)片(pian)(pian)可分(fen)(fen)為核酸芯(xin)片(pian)(pian)、蛋(dan)白芯(xin)片(pian)(pian)、細胞芯(xin)片(pian)(pian)、組織芯(xin)片(pian)(pian)、芯(xin)片(pian)(pian)實驗(yan)室等。本指(zhi)導(dao)原(yuan)則是針對核酸和蛋(dan)白為檢測靶(ba)分(fen)(fen)子生(sheng)物芯(xin)片(pian)(pian)的生(sheng)產(chan)及質量控(kong)制(zhi)技術指(zhi)導(dao)原(yuan)則，其它類型靶(ba)分(fen)(fen)子檢測的芯(xin)片(pian)(pian)診(zhen)斷試劑可參(can)考(kao)本指(zhi)導(dao)原(yuan)則。
由于生物芯片技術(shu)還在不斷發(fa)展(zhan)，國(guo)家食品(pin)藥品(pin)監督(du)管理部門(men)可依據科學(xue)技術(shu)發(fa)展(zhan)的需要，適時組織對本指導原則進行修訂。
一、基本原則
（一）生(sheng)物芯片診(zhen)斷試劑生(sheng)產(chan)用(yong)的物料包(bao)括：原料，輔料和包(bao)裝材料。各種物料應當制定相應的質量指(zhi)標，并應符合有關法(fa)規的要求。
（二(er)）生(sheng)物芯片診斷試(shi)劑(ji)的生(sheng)產(chan)企業(ye)應具(ju)備相應的專(zhuan)業(ye)技術人員(yuan)，相適應的儀器(qi)設備和生(sheng)產(chan)環境，獲(huo)得《醫療器(qi)械生(sheng)產(chan)許可證(zheng)》；應當按照《體外診斷試(shi)劑(ji)生(sheng)產(chan)實(shi)施細則(ze)（試(shi)行）》的要(yao)求(qiu)建(jian)立相應的質量(liang)管理體系，形成文件(jian)和記錄(lu)，加以實(shi)施并(bing)保持有效運行；應當通過(guo)《體外診斷試(shi)劑(ji)生(sheng)產(chan)企業(ye)質量(liang)管理體系考核(he)評定標準（試(shi)行）》的考核(he)。
（三）生物芯(xin)片診(zhen)斷(duan)試劑(ji)的研制應(ying)當按照科(ke)學(xue)、規范的原(yuan)則(ze)組(zu)織研發，各反應(ying)條(tiao)件的選擇和確定應(ying)符(fu)合基本的科(ke)學(xue)原(yuan)理。
（四(si)）生物芯片(pian)診斷試劑生產過程(cheng)中所用的物料及工(gong)藝，應充分考慮可能涉及的安全性方面的事宜(yi)。
二、物料質量控制
（一）核酸檢測芯片
核酸(suan)芯(xin)片(pian)(pian)(pian)檢(jian)測時，從生物(wu)樣本中提取(qu)的核酸(suan)可用熒光(guang)標(biao)(biao)記(ji)(ji)、金標(biao)(biao)記(ji)(ji)和酶(mei)標(biao)(biao)記(ji)(ji)。檢(jian)測方(fang)法包(bao)括光(guang)譜學方(fang)法和化學顯(xian)色(se)。下面為熒光(guang)標(biao)(biao)記(ji)(ji)芯(xin)片(pian)(pian)(pian)技術指導原(yuan)則，采用金標(biao)(biao)記(ji)(ji)和酶(mei)聯顯(xian)色(se)等的生物(wu)芯(xin)片(pian)(pian)(pian)診斷試劑可參照核酸(suan)芯(xin)片(pian)(pian)(pian)和蛋白芯(xin)片(pian)(pian)(pian)相關部分。
1、主要生物原料
核酸檢測芯片的(de)主要(yao)生物原(yuan)料(liao)包括模(mo)板DNA、dNTPs、引物、探(tan)針、標記物等(deng)。應按照工藝(yi)要(yao)求對這類生物原(yuan)料(liao)進行質(zhi)量(liang)檢驗，以保證(zheng)其達到規定(ding)的(de)質(zhi)量(liang)標準(zhun)。主要(yao)生物原(yuan)料(liao)的(de)供(gong)應商(shang)要(yao)求相對固定(ding)，不得隨意變更(geng)供(gong)應商(shang)。
（1）模板DNA
重組DNA：經測序驗證，關鍵位置沒有錯誤。1×TE溶解，濃度為1μg/μl以上，-20℃保存。
（2）dNTPs（dATP/dUTP/dGTP/dCTP/dTTP）
HPLC純，PCR級，無DNase、RNase污染。-20℃以下保(bao)存。外購者，由(you)生產廠家(jia)提供質量保(bao)證證明，達(da)到生產要(yao)求。
（3）引物
序列(lie)確(que)證(zheng)；進行PCR擴增后，克(ke)隆(long)測序鑒(jian)定驗證(zheng)，建立引(yin)物標準品。生產中的(de)引(yin)物原材料為凍干粉，PAGE純或HPLC純，外購者，供應(ying)商應(ying)提供該產品的(de)質檢證(zheng)明，如(ru)PAGE電泳(yong)結果或HPLC分(fen)析圖(tu)譜；自己合(he)成的(de)引(yin)物，需有PAGE電泳(yong)結果或HPLC分(fen)析圖(tu)譜。用(yong)標準DNA模板擴增，電泳(yong)檢測，譜帶單(dan)一，大小正確(que)，與對照引(yin)物比較，產物量(liang)一致。符合(he)視為合(he)格(ge)引(yin)物。-20℃以下(xia)保(bao)存。
（4）探(tan)針（用于陣(zhen)列制備）
重組DNA, 凍干粉（或1×TE溶解液）：每種90μg以(yi)上，酶切鑒定分析圖(tu)譜。
PCR產物，凍干粉（或1×TE溶解液）：每種90μg以上，PCR電泳鑒(jian)定(ding)圖譜。
合成寡核苷酸：PAGE純或HPLC純，每種90μg以上(shang)，提供(gong)(gong)該(gai)產(chan)品(pin)的PAGE電泳分(fen)(fen)析(xi)圖譜或HPLC分(fen)(fen)析(xi)圖譜。外購者，供(gong)(gong)應商應提供(gong)(gong)質量保證(zheng)證(zheng)明，達到生產(chan)要求。
探針序列的正確性：應用克(ke)隆鑒(jian)(jian)定的標準(zhun)DNA雜交鑒(jian)(jian)定或進行測序鑒(jian)(jian)定。外(wai)購者(zhe)，供(gong)應商應提(ti)供(gong)質量保證證明，達到生產要求。
純(chun)度(du)(du)(du)和濃(nong)度(du)(du)(du)檢測：用(yong)電泳方法(fa)，電泳圖譜沒(mei)有(you)雜帶(dai)，目(mu)標(biao)條(tiao)帶(dai)的強(qiang)度(du)(du)(du)與已知濃(nong)度(du)(du)(du)的標(biao)準DNA條(tiao)帶(dai)進行(xing)參比(bi)計算其強(qiang)度(du)(du)(du)。純(chun)度(du)(du)(du)較高的DNA，可(ke)用(yong)紫(zi)外分光(guang)光(guang)度(du)(du)(du)計進行(xing)定量。檢定合格(ge)后(hou)入(ru)庫。避光(guang)、-20℃以下保存。
（5）標記物
含有激發光(guang)波長和發射光(guang)波長介于280~680nm的所有熒光(guang)分(fen)子(zi)，HPLC純，供(gong)應商應提供(gong)質量保(bao)證(zheng)證(zheng)明。
（6）Taq DNA聚合酶
SDS-PAGE 檢測，純度＞95%，具DNA聚合酶活性(xing)(xing)，無核(he)酸外切(qie)酶活性(xing)(xing)及核(he)酸內切(qie)酶活性(xing)(xing)，具熱穩定性(xing)(xing)，94℃1小時后仍保持50％活性(xing)(xing)，由供(gong)應商提供(gong)質量保證。-20℃保存。
（7）UNG（尿嘧啶糖基化酶）
具(ju)尿嘧啶糖基化酶活(huo)性(xing)，無核酸(suan)外切(qie)酶及核酸(suan)內(nei)切(qie)酶活(huo)性(xing)。1U UNG 37℃處理3分鐘后(hou)，103拷貝(bei)以下含U模板被降解后(hou)，不(bu)能產生(sheng)擴增產物，供(gong)應商提(ti)供(gong)質量保(bao)證。-20℃保(bao)存。
（8）RT 酶
具有逆轉(zhuan)錄活(huo)性(xing)，供(gong)應商提供(gong)質量保證。-20℃保存。
（9）RT-PCR酶
具逆(ni)轉錄(lu)酶活(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)和DNA聚合酶活(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)，無(wu)核酸(suan)外切酶活(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)及核酸(suan)內(nei)切酶活(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)，具熱穩定性(xing)(xing)(xing)(xing)，94℃1小時后(hou)仍(reng)保持50％活(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)。-20℃保存。
（10）緩沖液
各類(lei)酶(mei)制品(pin)(pin)需要的的反應緩沖液由廠家隨(sui)酶(mei)制品(pin)(pin)提(ti)供，供應商提(ti)供質量保(bao)證(zheng)。-20℃保(bao)存(cun)。
2、主要生物輔料
（1）雜交液
購買成(cheng)品者(zhe)，供應商提(ti)供質(zhi)量標準(zhun)，并按(an)要求保(bao)存。自制雜交液，按(an)半成(cheng)品檢(jian)定標準(zhun)要求進行檢(jian)定。
（2）酶類
蛋白酶、核酸酶等，供應商提供質(zhi)量標(biao)準，并按要求保存。
（3）核酸提取試劑
供應商(shang)提供質量保證，并按要求保存(cun)。如(ru)果是自制提取液(ye)，按半成品檢定要求。
（4）魚精DNA
供應商提供質量保證，并按(an)要(yao)求保存(cun)。
（5）封閉用蛋白
包括牛血清白(bai)蛋白(bai)，奶粉等(deng)，提供質量標準，并按要求保存。
3、主要化學原輔料
參照《中國生物制品主(zhu)(zhu)要原輔(fu)材料質控標準（2000年版）》分析(xi)純(chun)級(ji)別(bie)進行檢(jian)驗。主(zhu)(zhu)要的(de)檢(jian)測(ce)指(zhi)標包括：溶液外觀、一般(ban)鹽類檢(jian)測(ce)、溶液pH值(zhi)檢(jian)測(ce)、溶解情況檢(jian)測(ce)、干燥(zao)失(shi)重的(de)檢(jian)測(ce)、熾(chi)灼殘渣等。
主(zhu)要化學原(yuan)(yuan)材(cai)料(liao)的供(gong)應商要求(qiu)相(xiang)對固(gu)定，不得隨意發生(sheng)變(bian)更。化學原(yuan)(yuan)材(cai)料(liao)在購入(ru)時，原(yuan)(yuan)材(cai)料(liao)的生(sheng)產(chan)商必須提(ti)供(gong)該批次化學原(yuan)(yuan)材(cai)料(liao)的質(zhi)量(liang)質(zhi)量(liang)保證材(cai)料(liao)和質(zhi)量(liang)檢驗(yan)報告，其質(zhi)量(liang)標準(zhun)應達(da)到生(sheng)產(chan)所需的質(zhi)量(liang)標準(zhun)。
（1）無機類
主要包(bao)括氯(lv)化(hua)(hua)鈉、氫氧化(hua)(hua)鈉、純(chun)化(hua)(hua)水等。
（2）有機類
主要(yao)包括(kuo)有丙酮、乙醇、枸櫞(yuan)酸、吐(tu)溫20、乙二(er)胺四乙酸二(er)鈉、氨基吡(bi)啉等(deng)。
（3）特殊化學原料
聚乙(yi)二醇，多聚賴氨(an)酸，丙(bing)烯酰胺(an)，甲(jia)(jia)叉雙丙(bing)烯酰胺(an)，N,N,N',N'-四甲(jia)(jia)基二乙(yi)胺(an)（TEMED）、溴化乙(yi)錠(ding)（EB）、染色劑等。
4、其他物料
（1）載玻片
外觀：明(ming)亮處用(yong)肉眼觀察無(wu)缺刻，無(wu)劃傷等(deng)。規格按設計要求(qiu)。
激光掃描儀掃描（波(bo)(bo)長為(wei)芯(xin)片檢測波(bo)(bo)長）：包被層基(ji)本均勻(yun)。
（2）試管、吸頭、試劑瓶等
一次性使用，由生產(chan)廠家提供質量保證，達到設(she)計要求。
（3）其他：說明(ming)書、包裝外盒等
參照國家食(shi)品(pin)藥品(pin)監督管(guan)理局頒布的(de)《體外診斷試劑說(shuo)明書(shu)編寫指導原則》和《醫(yi)療器械說(shuo)明書(shu)、標(biao)簽和包裝標(biao)識管(guan)理規定(ding)》執行。
（二）蛋白檢測芯片
1、主要生物原料
與生(sheng)(sheng)產(chan)的產(chan)品質量最(zui)密切相(xiang)關(guan)的生(sheng)(sheng)物原(yuan)料(liao)包括各種活性抗(kang)(kang)原(yuan)、重(zhong)組抗(kang)(kang)原(yuan)、單克隆杭體、多克隆抗(kang)(kang)體以及多肽(tai)類(lei)生(sheng)(sheng)物原(yuan)科(ke)。這類(lei)原(yuan)料(liao)可用(yong)于點膜、標記相(xiang)關(guan)酶、納米金、光學基(ji)團及中和反應用(yong)抗(kang)(kang)原(yuan)或(huo)抗(kang)(kang)體等(deng)。使用(yong)前應按(an)工(gong)藝要(yao)(yao)求(qiu)對這類(lei)生(sheng)(sheng)物原(yuan)料(liao)進(jin)行質量檢驗，以保(bao)證其(qi)達(da)到規定的質量要(yao)(yao)求(qiu)。主(zhu)要(yao)(yao)生(sheng)(sheng)物原(yuan)料(liao)若為企業自(zi)己生(sheng)(sheng)產(chan)，其(qi)工(gong)藝必須相(xiang)對穩定；若購買，其(qi)供(gong)應商要(yao)(yao)求(qiu)相(xiang)對固(gu)定，不(bu)能隨意變(bian)更(geng)供(gong)應商，如果主(zhu)要(yao)(yao)原(yuan)料(liao)（包括工(gong)藝）或(huo)其(qi)供(gong)應商有變(bian)更(geng)，必須進(jin)行原(yuan)料(liao)驗證，并進(jin)行補充申報(bao)。
主要生物原料的常規檢驗項目一般包括：
（1）外觀
肉(rou)眼觀察，大(da)部(bu)分生(sheng)物(wu)原料為澄清透明的(de)液體，不(bu)含異物(wu)，渾濁或(huo)搖不(bu)散的(de)沉淀；或(huo)者為白色(se)粉末，不(bu)含有(you)其他顏色(se)的(de)雜質；特殊生(sheng)物(wu)原料應具(ju)備相(xiang)應外觀標準。
（2）純度和分子量
主(zhu)要通過SDS-PAGE電(dian)泳(yong)(yong)和(he)電(dian)泳(yong)(yong)結果掃描儀進行檢測，也(ye)可用(yong)(yong)其他適宜的方法(fa)，如(ru)高效(xiao)液相法(fa)等。作為免疫診斷試劑用(yong)(yong)生物原材料，用(yong)(yong)銀染法(fa)染色后(hou)，純度(du)一般都(dou)要大(da)于90％；用(yong)(yong)考瑪氏亮(liang)藍(lan)染色后(hou)；純度(du)一般都(dou)要大(da)于95％。SDS凝膠電(dian)泳(yong)(yong)法(fa)測定分(fen)子量。
（3）蛋白濃度
蛋白濃度(du)可通過Lowry法(fa)(fa)、280nm光吸收法(fa)(fa)、雙縮脲方法(fa)(fa)等進行(xing)檢測；
（4）效價
效(xiao)價的測定一般(ban)根(gen)據蛋白(bai)含量測定結果(guo)通過倍比稀釋法進(jin)行。效(xiao)價應達(da)到設計規定的要求。
（5）功能性實驗
功能性(xing)實驗是指生物原料(liao)(liao)用于試(shi)劑盒試(shi)劑實際生產中(zhong)的情況，一般考(kao)查該(gai)原料(liao)(liao)使用后(hou)的試(shi)劑靈敏度、特異性(xing)和穩定性(xing)。
2、主要生物輔料
生(sheng)(sheng)(sheng)物輔料(liao)(liao)指的(de)(de)是在生(sheng)(sheng)(sheng)產過程中作為蛋白保護劑用途的(de)(de)一類生(sheng)(sheng)(sheng)物原(yuan)料(liao)(liao)，主要(yao)(yao)包括小牛血(xue)清、山羊血(xue)清、牛血(xue)清白蛋白和酪蛋白等(deng)。這(zhe)些(xie)生(sheng)(sheng)(sheng)物原(yuan)料(liao)(liao)均應按照《中國生(sheng)(sheng)(sheng)物制品主要(yao)(yao)原(yuan)輔材料(liao)(liao)質(zhi)控標(biao)準（2000年版）》所規定的(de)(de)質(zhi)量標(biao)準要(yao)(yao)求(qiu)進行檢(jian)驗，達到相應的(de)(de)質(zhi)量標(biao)準后方應用于生(sheng)(sheng)(sheng)產。
生物(wu)輔料的供(gong)應商(shang)同(tong)樣要求相對固定，不得(de)隨意變更(geng)供(gong)應商(shang)。
對于小(xiao)牛血清(qing)或山羊血清(qing)、牛血清(qing)白蛋白以(yi)及(ji)酪蛋白等，還應(ying)進行功能性實驗，即以(yi)其為(wei)原(yuan)料配制10％濃度(du)的稀釋(shi)液作為(wei)樣品(pin)，進行酶聯免疫測定，均不得出(chu)現非特(te)異性反應(ying)。
對于(yu)標記用酶(mei)，應在產(chan)品的質(zhi)量標準中明示所使用的標記用酶(mei)的名稱（如辣根過氧化物酶(mei)、堿性磷酸酶(mei)等），同(tong)(tong)時應根據不同(tong)(tong)生產(chan)廠(chang)家的檢(jian)定方法和(he)質(zhi)量標準進行檢(jian)驗，酶(mei)的純度(du)RZ值（OD403nm/OD280nm）應大(da)于(yu)3.0。
3、化學原輔料
參照《中國生物制品主(zhu)要原輔材料質控標準（2000年版）》分析純級別進行檢(jian)(jian)(jian)驗。主(zhu)要的檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)指標包(bao)括：溶液(ye)外觀、一般鹽類檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)、溶液(ye)pH值檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)、溶解情況(kuang)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)、干燥(zao)失(shi)重的檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)、熾灼殘渣等。
主要化學(xue)原(yuan)(yuan)(yuan)材(cai)(cai)(cai)料(liao)的(de)(de)供應商(shang)要求相對(dui)固(gu)定，不(bu)得隨意發(fa)生變更。化學(xue)原(yuan)(yuan)(yuan)材(cai)(cai)(cai)料(liao)在購入時，原(yuan)(yuan)(yuan)材(cai)(cai)(cai)料(liao)的(de)(de)生產商(shang)必(bi)須(xu)提供該批次化學(xue)原(yuan)(yuan)(yuan)材(cai)(cai)(cai)料(liao)的(de)(de)質量質量保證材(cai)(cai)(cai)料(liao)和(he)質量檢驗報告，其質量標(biao)準(zhun)應達到生產所需的(de)(de)質量標(biao)準(zhun)。
（1）無機類
主要(yao)包括氯化(hua)鈉、氫(qing)氧化(hua)鈉、純化(hua)水等。
（2）有機類
主要(yao)包括(kuo)有丙酮、乙(yi)醇、枸櫞酸(suan)、吐溫20、乙(yi)二胺四乙(yi)酸(suan)二鈉、氨基(ji)吡啉等(deng)。
（3）特殊化學原料
DAB（聯苯二(er)胺），染色劑等。
4、其他物料
（1）基質
以硝酸纖維素膜為例：孔徑符合設計要求（0.45μm、0.22μm等）、均一性（厚度及毛細遷移速度±20％）、尺(chi)寸（與(yu)標識吻(wen)合）
（2）瓶子和干燥劑
由生產廠家提供(gong)質(zhi)量保證，達到規定要求。
（3）其(qi)他(ta)：說明書、包裝外(wai)盒等
應參照國家食品(pin)藥品(pin)監(jian)督管理(li)局頒布的《體(ti)外診斷試(shi)劑說(shuo)明書(shu)編寫指導(dao)原則》和《醫療器械說(shuo)明書(shu)、標簽(qian)和包裝標識管理(li)規定(ding)》執(zhi)行。
三(san)、試(shi)劑盒各組分(fen)的生產(chan)
生物芯(xin)(xin)片(pian)(pian)主要包括DNA芯(xin)(xin)片(pian)(pian)、蛋白芯(xin)(xin)片(pian)(pian)、組(zu)織(zhi)芯(xin)(xin)片(pian)(pian)、細胞芯(xin)(xin)片(pian)(pian)以及芯(xin)(xin)片(pian)(pian)實驗室等。生物芯(xin)(xin)片(pian)(pian)診斷(duan)試劑(ji)產品基本可分(fen)成(cheng)二個部分(fen)，一部分(fen)是芯(xin)(xin)片(pian)(pian)，另一部分(fen)檢測用工作液。如果有(you)配套(tao)的(de)檢測儀器，還需對儀器及處理(li)軟件(jian)的(de)應(ying)用加以說明(ming)。
（一）芯片的生產
芯片(pian)生產的基本過程(cheng)包括探針的獲取方法(fa)，純(chun)化，點樣，固定。
1、探針獲取
不(bu)同的芯片(pian)，主要(yao)是探(tan)針(zhen)(zhen)不(bu)同，生物芯片(pian)的探(tan)針(zhen)(zhen)主要(yao)包(bao)括以下幾(ji)類，其(qi)它探(tan)針(zhen)(zhen)可參考制定(ding)相(xiang)應的技術及質量標準(zhun)。
（1）DNA探針(zhen)的(de)獲取(qu)
探針的形式有PCR產物、克隆DNA、人(ren)工合成DNA片段等(deng)；要求有生產程(cheng)序和質量(liang)指標及檢測方法，要進(jin)行純化(hua)，有固定(ding)的純化(hua)程(cheng)序。
（2）抗原的生產
抗(kang)原的獲得方(fang)法包括細胞培養、從生物材料中(zhong)分離提(ti)取、基(ji)因工(gong)程表(biao)達以及合成肽等(deng)。基(ji)因工(gong)程表(biao)達產(chan)物又分為純抗(kang)原蛋白、融合蛋白等(deng)。
（3）抗體
抗(kang)(kang)體(ti)(ti)分單(dan)克(ke)隆抗(kang)(kang)體(ti)(ti)和多克(ke)隆抗(kang)(kang)體(ti)(ti)。抗(kang)(kang)體(ti)(ti)制備(bei)包(bao)括細胞培養，動(dong)物腹水，基因工程表達等方式。
（4）細胞和組織
包括細胞或組織(zhi)類(lei)型，固定(ding)方法。組織(zhi)材料還包括固定(ding)，包埋，切(qie)片(pian)等。
（5）芯片(pian)實驗室，包括各種管(guan)道泵的(de)制作等(deng)。
2、陣列的排列設計
陣列的排(pai)(pai)列包括依次(ci)排(pai)(pai)列、隨(sui)機排(pai)(pai)列、對角(jiao)線排(pai)(pai)列等，設計時需考慮重復次(ci)數等。
3、點陣的制作
使用儀器(qi)的要(yao)確定型號，程序；手工制作的也要(yao)有標準(zhun)操作程序。
4、固(gu)定：包括固(gu)定方式，固(gu)定的條件等。
應(ying)對芯片(pian)生(sheng)產的過(guo)程進行(xing)相(xiang)應(ying)的質量控(kong)(kong)制，如點(dian)樣和(he)固定過(guo)程的監控(kong)(kong)、點(dian)樣均一性檢驗等。
（二）工作液配制
1、芯(xin)片生產所需(xu)試(shi)劑(ji)，包括細胞培養基，探針制備試(shi)劑(ji)，陣列制作和固定試(shi)劑(ji)等。
2、樣(yang)(yang)品(pin)處理試(shi)劑(ji)(ji)(ji)，芯(xin)片(pian)檢(jian)測(ce)靶(ba)分(fen)子分(fen)為核(he)酸和蛋(dan)(dan)白質。檢(jian)測(ce)核(he)酸的樣(yang)(yang)品(pin)處理試(shi)劑(ji)(ji)(ji)包括臨(lin)床取樣(yang)(yang)，DNA提取或(huo)RNA提取試(shi)劑(ji)(ji)(ji)，逆轉(zhuan)錄試(shi)劑(ji)(ji)(ji)，PCR擴增試(shi)劑(ji)(ji)(ji)，核(he)酸標記試(shi)劑(ji)(ji)(ji)等；檢(jian)測(ce)蛋(dan)(dan)白的處理試(shi)劑(ji)(ji)(ji)包括取樣(yang)(yang)試(shi)劑(ji)(ji)(ji)，蛋(dan)(dan)白稀釋液以及特殊試(shi)劑(ji)(ji)(ji)等。
3、反應(ying)液(ye)(ye)(ye)：檢測核酸時的反應(ying)液(ye)(ye)(ye)包括預(yu)雜(za)交(jiao)液(ye)(ye)(ye)，雜(za)交(jiao)液(ye)(ye)(ye)，洗(xi)脫液(ye)(ye)(ye)等；檢測蛋(dan)白時，包括封閉液(ye)(ye)(ye)，抗原/抗體(ti)反應(ying)液(ye)(ye)(ye)，洗(xi)脫液(ye)(ye)(ye)，顯(xian)色(se)液(ye)(ye)(ye)，顯(xian)色(se)終止液(ye)(ye)(ye)等。
（三）數據判讀
1、判(pan)斷標準(zhun)及依據，包括Cut off值的確(que)定依據。
2、數據(ju)判(pan)讀(du)方式：人(ren)工還是軟(ruan)件判(pan)讀(du)。
3、如果是軟(ruan)(ruan)件判(pan)讀，應(ying)提供軟(ruan)(ruan)件判(pan)斷(duan)的科學依據(ju)（包括生物學原(yuan)(yuan)理(li)、數據(ju)獲取原(yuan)(yuan)理(li)和判(pan)斷(duan)實驗是否成(cheng)立的依據(ju)）以(yi)及實驗測試(shi)的原(yuan)(yuan)始報告（或數據(ju)），并需(xu)要說(shuo)明：
（1）軟件(jian)的(de)來源：購買(mai)或自己(ji)編制(zhi)，是否獲得注冊等。
（2）軟件的用(yong)途：包(bao)括對數據的分析、存儲、解讀、含義等。
（3）軟件(jian)的使用：基本的使用程序。
四、半成品質量控制
（一）抽樣
檢驗人員按批(pi)號抽取(qu)檢定(ding)需要數(shu)量(liang)的半成(cheng)品，作好標記，待檢。
（二）質控(kong)品
可(ke)用(yong)克隆并測(ce)序鑒(jian)定(ding)的(de)DNA或(huo)經特異(yi)性鑒(jian)定(ding)的(de)抗原（或(huo)抗體）。質控品的(de)基(ji)質應(ying)盡(jin)可(ke)能與(yu)被測(ce)物基(ji)質相(xiang)一致(zhi)。
（三）檢定要求
1、芯片檢定
（1）靈敏度(du)：最(zui)低檢測限(xian)達到規定要(yao)求。
（2）特(te)異性(xing)：應(ying)(ying)(ying)達到規定要(yao)求。若進(jin)行全(quan)陰、全(quan)陽和(he)交(jiao)叉(cha)反應(ying)(ying)(ying)檢(jian)測(ce)，全(quan)陰性(xing)檢(jian)測(ce)應(ying)(ying)(ying)在(zai)沒(mei)有(you)(you)(you)靶分(fen)子(zi)存在(zai)時，所有(you)(you)(you)檢(jian)測(ce)位(wei)點(dian)(dian)沒(mei)有(you)(you)(you)檢(jian)測(ce)信號；全(quan)陽性(xing)檢(jian)測(ce)應(ying)(ying)(ying)在(zai)加入足夠(gou)量的靶分(fen)子(zi)，所有(you)(you)(you)檢(jian)測(ce)位(wei)點(dian)(dian)均有(you)(you)(you)檢(jian)測(ce)信號；交(jiao)叉(cha)反應(ying)(ying)(ying)檢(jian)測(ce)時，用某一位(wei)點(dian)(dian)的靶分(fen)子(zi)檢(jian)測(ce)，應(ying)(ying)(ying)只(zhi)有(you)(you)(you)該位(wei)點(dian)(dian)有(you)(you)(you)檢(jian)測(ce)信號，其它位(wei)點(dian)(dian)不(bu)能有(you)(you)(you)檢(jian)測(ce)信號。
（3）精密性(xing)（均一性(xing)）：用比(bi)最低檢(jian)測(ce)限高一個數量級的質控品，重復檢(jian)測(ce)10次，判定結(jie)果(guo)一致(zhi)。
考慮到芯片的多位點檢(jian)(jian)測，因此要進行(xing)全位點和單(dan)個位點進行(xing)檢(jian)(jian)測。半成(cheng)品檢(jian)(jian)定(ding)(ding)可以用克隆DNA和鑒定(ding)(ding)的抗原和抗體作質控(kong)品。
2、工作液的檢定
（1）物理(li)檢測：外觀顏色正常，沒有雜質(zhi)。
（2）質量檢(jian)定：用被檢(jian)定的工作液檢(jian)測(ce)標準樣，檢(jian)測(ce)結果達(da)到(dao)預定要求。
五、成品質量控制
（一）生產批量
申報(bao)生(sheng)產的批量(liang)每批原則上不(bu)低(di)于1000人份。
（二）抽樣
檢驗人(ren)員按批號抽(chou)取檢定(ding)需要數量的(de)半成品(pin)，做好標(biao)記，待檢。
（三）標準品(pin)（參考品(pin)）
應用國家標準品(pin)或(huo)參考品(pin)進行檢定，若(ruo)無國家標準品(pin)（參考品(pin)），可以使用企業(ye)參考品(pin)，但其(qi)標準不(bu)得低(di)于第一家已經獲得批準的(de)該類試劑。
（四）檢定要求
1、靈敏度：應(ying)達到(dao)規定(ding)要求。
2、特異性：應達到(dao)規定要求。
3、精密性（均一性）：對某一樣本(ben)，重復(fu)10次，對病種的定(ding)性檢(jian)測結果一致。
4、穩(wen)定性（僅(jin)對(dui)蛋白芯片(pian)）
37℃放置至(zhi)少3天，靈敏度(du)、特異(yi)性和精密(mi)度(du)仍達到規定要求。熱(re)加速破壞試(shi)驗的時(shi)間長短，可由生產單位根據不(bu)同產品在37℃貯(zhu)存(cun)與常溫貯(zhu)存(cun)（2℃~8℃）中質(zhi)量變化(hua)的相關性來決定。
全國服務熱線：
