體外診斷(duan)試(shi)劑分析性能評估（準(zhun)確度(du)-方法(fa)學比對）
技術審查指導原則
一、前(qian)言(yan)
準確度評估資料是評價擬上(shang)市產品有(you)效性的重要(yao)(yao)依據，也是產品注冊所需的重要(yao)(yao)申(shen)報資料之(zhi)一(yi)。定量檢測方法(fa)的方法(fa)學比(bi)對(dui)試驗是評估準確度的方法(fa)之(zhi)一(yi)，可以(yi)與(yu)參考方法(fa)或(huo)臨床公(gong)認(ren)質量較好的已(yi)上(shang)市產品進(jin)行(xing)比(bi)對(dui)。
本指導(dao)原(yuan)則基(ji)于國家(jia)食品藥品監督管(guan)理(li)(li)局《體外診斷(duan)試(shi)劑注(zhu)冊管(guan)理(li)(li)辦法(fa)（試(shi)行(xing)）》的(de)有關要求，參(can)考(kao)(kao)CLSI有關標準，對(dui)采用(yong)方法(fa)學(xue)比對(dui)進(jin)行(xing)準確度(du)(du)評(ping)估(gu)的(de)實驗方法(fa)和數(shu)據處理(li)(li)方法(fa)進(jin)行(xing)了原(yuan)則性要求。其目的(de)是為生產企業采用(yong)方法(fa)學(xue)比對(dui)進(jin)行(xing)準確度(du)(du)評(ping)估(gu)并(bing)準備準確度(du)(du)評(ping)估(gu)資料提供原(yuan)則性指導(dao)，也為注(zhu)冊管(guan)理(li)(li)部(bu)門(men)審核該部(bu)分(fen)分(fen)析性能評(ping)估(gu)資料提供技術參(can)考(kao)(kao)。
由于體外(wai)診斷試(shi)劑產品發展(zhan)速(su)度快、專(zhuan)業跨(kua)度大，國家食(shi)品藥品監督管理局將(jiang)根據體外(wai)診斷試(shi)劑發展(zhan)的需要，適時對(dui)本指導原則進行修(xiu)訂。
二(er)、適用范圍
本指導原則適(shi)用(yong)于首次申(shen)請(qing)注(zhu)冊、申(shen)請(qing)許可事項變更的用(yong)于定量檢測(ce)的體外診斷(duan)產品。因(yin)體外診斷(duan)產品評價(jia)(jia)是(shi)將儀器、試劑、質控品、校準品等作為一個系(xi)(xi)統(tong)進(jin)(jin)行評價(jia)(jia)，因(yin)此方法學比對(dui)的評價(jia)(jia)采(cai)用(yong)系(xi)(xi)統(tong)的概(gai)念進(jin)(jin)行描述。如特殊產品不適(shi)用(yong)于本指導原則，可進(jin)(jin)行詳細(xi)說明并(bing)采(cai)用(yong)適(shi)當(dang)的方法進(jin)(jin)行準確度評價(jia)(jia)。
三、基本要求(qiu)
（一）方法學比對實驗的基本要求
1.操(cao)(cao)作者應熟(shu)悉待評(ping)價系(xi)統(tong)和比(bi)對系(xi)統(tong)的(de)操(cao)(cao)作。
2.編寫系統(tong)標準(zhun)操(cao)作規程，其中(zhong)包括(kuo)校準(zhun)程序和室內質控程序，采(cai)用合適的校準(zhun)品(pin)、質控品(pin)并保(bao)持儀(yi)器處于正(zheng)常狀態(tai)。
3.比對系統的選擇
比對系統應具有以下條(tiao)件：
（1）具(ju)有比(bi)待評價系統(tong)更好的精密度；
（2）同待評價(jia)系(xi)統檢測結果具有相(xiang)同的單位；
（3）如有參考方法應具有與參考方法已(yi)知的偏差。
比(bi)對系統應該選擇正(zheng)確性經(jing)過驗證的系統，根(gen)據實際條件(jian)，選擇的順序(xu)如下(xia)：參考方(fang)法、原裝(zhuang)系統、配套系統、經(jing)過驗證的非配套系統。
4.待評價系統的處(chu)理
進行方法學對(dui)(dui)比(bi)實驗(yan)前(qian)，應該對(dui)(dui)待(dai)評價(jia)系(xi)(xi)統(tong)進行初(chu)步評價(jia)，并且對(dui)(dui)待(dai)評價(jia)系(xi)(xi)統(tong)進行精密度及線性的(de)評價(jia)（參考相關標準(zhun)），只有在以(yi)上(shang)評價(jia)完成并且符合相關標準(zhun)要(yao)求(qiu)后(hou)，才可進行方法學對(dui)(dui)比(bi)實驗(yan)。
（二）方法學(xue)比對實驗的(de)評(ping)估(gu)及數據處理方法
1.實驗樣本的(de)基本要求(qiu)
（1）按照實(shi)驗對樣本(ben)的要求(qiu)收集處理病人樣本(ben)，樣本(ben)貯存時間及條件由被測(ce)組分的穩定性而定，盡可能避免使用貯存的樣本(ben)。
（2）樣(yang)本應(ying)來(lai)自于(yu)不同患者，并且此患者所患疾病對于(yu)被測(ce)組(zu)(zu)分的(de)影響應(ying)該是已知的(de)，樣(yang)本不應(ying)含有干擾此方法的(de)組(zu)(zu)分。
（3）樣本(ben)(ben)濃(nong)度(du)應(ying)在(zai)方法的(de)線(xian)性范(fan)圍(wei)內(nei)，并覆蓋(gai)醫學決定(ding)水平。通(tong)常基本(ben)(ben)從線(xian)性范(fan)圍(wei)的(de)低限到線(xian)性范(fan)圍(wei)的(de)高(gao)限（應(ying)至少有50％的(de)樣本(ben)(ben)在(zai)參(can)考(kao)范(fan)圍(wei)以(yi)外，但在(zai)線(xian)性范(fan)圍(wei)內(nei)）。分析樣本(ben)(ben)的(de)濃(nong)度(du)應(ying)盡可能(neng)在(zai)線(xian)性范(fan)圍(wei)內(nei)均勻分布(bu)。商品質控物或者校準(zhun)物可能(neng)存在(zai)基質效(xiao)應(ying)，應(ying)避免使用。
2.實驗(yan)過程
（1）每天選擇8個臨床患(huan)者樣本，按(an)1到8的順序(xu)編號。用兩(liang)種方法同時(shi)進行實驗，按(an)照1，2，3，4，5，6，7，8，8，7，6，5，4，3，2，1的樣本順序(xu)進行測定(ding)。
（2）以上實(shi)驗至(zhi)少重復5天，即至(zhi)少分析40個不同的(de)(de)臨床患者樣本。每天實(shi)驗必須進行校準(zhun)和(he)室(shi)(shi)內質控，只有在室(shi)(shi)內質控合格(ge)的(de)(de)情況下(xia)，當天的(de)(de)實(shi)驗室(shi)(shi)數據才有效(xiao)。
3.數據處理及(ji)結果報告
（1）記錄測定結果（Xij和(he)Yij），
Xij 為比對系(xi)統測定值
Yij為待評價系(xi)統測定值
i為測定樣本的序號（1、2、3…40）
j為同一樣本(ben)同一天測(ce)定的次序(xu)（1、2）
（2） 計算每個樣本(ben)測(ce)定的均值(zhi)（和），樣本(ben)重復測(ce)定間差(cha)值(zhi)的絕對值(zhi)（DXi 和DYi）及兩種方法(fa)測(ce)定結(jie)果間的均值(zhi)差(cha)值(zhi)（-）。相關實(shi)驗記錄見表1。
表1
比對系統 | 待評價系統 | ||||||
樣本編號 i | Xi1 | Xi2 | DXi | Yi1 | Yi2 | DYi | |
1 | |||||||
2 | |||||||
3 | |||||||
4 | |||||||
┆ | |||||||
40 | |||||||
注： i＝1、2┄40。
＝
=
DXi=│-│
DYi=│-│
（3）以對作散點圖。
（4）以(yi)（-）對做偏倚圖(tu)。
（5）以（Yij-Xij）對做偏倚圖。
（6）檢查批內(nei)離群點：計算樣本(ben)重(zhong)復測定間(jian)差值(zhi)（DXi 和DYi）的平均數，
=
=
樣本重復(fu)測定(ding)間差(cha)值超出該平均數4倍時(shi)(shi)，則判斷為(wei)(wei)離群點(dian)，如(ru)離群點(dian)超過1個時(shi)(shi)，整組數據應舍棄(qi)，尋找原因后重新進(jin)行評(ping)價。如(ru)離群點(dian)為(wei)(wei)1個，可(ke)以補充數據后重新進(jin)行統計。
（7）檢查批(pi)間(jian)離(li)群(qun)點(dian)(dian)：計算兩種方(fang)法測定結果(guo)間(jian)均(jun)值差(cha)值(│-│)的(de)平均(jun)數(shu)，如兩種方(fang)法測定結果(guo)間(jian)均(jun)值差(cha)值超出該平均(jun)數(shu)4倍時，則(ze)判斷該樣(yang)本(ben)為離(li)群(qun)點(dian)(dian)，如離(li)群(qun)點(dian)(dian)超過(guo)1個時，整組數(shu)據(ju)應舍棄，尋找原因后(hou)重新進(jin)行評價。如離(li)群(qun)點(dian)(dian)為1個，可以補(bu)充(chong)數(shu)據(ju)后(hou)重新進(jin)行統(tong)計。
（8）相關(guan)系數(shu)計算：利用(yong)所有樣本雙份測定值進行相關(guan)系數(shu)計算，如(ru)果≥0.975(或2≥0.95)，則認(ren)為選擇的(de)數(shu)據范圍適合，數(shu)據滿足要求。該分析的(de)誤差可以由(you)數(shu)據范圍給以適當補償，并(bing)且可以采(cai)用(yong)簡單的(de)線性回歸來評價(jia)斜(xie)率和截距。
如果r2<0.95，那么必須通(tong)過(guo)分析另外(wai)一(yi)些(xie)樣(yang)品以擴大數(shu)據范(fan)圍，然(ran)后再檢查全部數(shu)據系列，如仍然(ran)r2<0.95，則(ze)應尋(xun)找待評價方(fang)法存在的缺陷，糾(jiu)正后重新進(jin)行試驗。
對于某(mou)些免疫項目，可適當放(fang)寬標準(zhun)，原則上r2≥0.90，則認為(wei)數據范圍適合，數據滿足要求(qiu)。
（9）回歸計算：利(li)用所有樣本雙份測定的有效(xiao)數(shu)據，計算兩(liang)個(ge)方法間的線性(xing)回歸方程：Y= bX＋a。
（10）偏差估計：在醫學決定水平，利用回歸方程計算預(yu)期偏差,預(yu)期偏差Bx=a+(b-1)X,相對偏差=Bx/X。
（11）結果(guo)評估：結果(guo)至少應滿足(zu)相關國際及國家標(biao)準(zhun)，同時(shi)滿足(zu)臨床需求(qiu)。
四、其他應(ying)注意的問(wen)題
（一）采用的患(huan)者樣本對于被測組分的影響應該是已知的，樣本不應含有(you)干擾此(ci)檢測方法的組分。
（二）樣本貯存時間及條件由(you)被測組分(fen)的穩(wen)定性而(er)定，盡可能(neng)避免(mian)使用貯存的樣本。
（三(san)）實(shi)(shi)驗(yan)前必須對(dui)待評(ping)價系統進行精密度及線(xian)性的評(ping)價，評(ping)價合格后方可進行實(shi)(shi)驗(yan)。
五(wu)、名(ming)詞解釋
（一）待評(ping)價系(xi)統(tong)：擬(ni)進行性(xing)能評(ping)估的產品。
（二）比(bi)對系統：參考方法（系統）或臨床(chuang)公認(ren)質量較好(hao)的已上(shang)市(shi)產品。
六、參考文獻：
; EP9-A2: Method comparison and bias estimation using patient samples; Approved Guideline-Second Edition.
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