附件6：
體外(wai)診斷(duan)試劑(ji)分析性能評估(gu)（準確度-回收(shou)實驗）
技術審查指導原則
一、前言
準(zhun)(zhun)確度評估(gu)資(zi)料(liao)是評價(jia)擬上市產(chan)(chan)品有(you)效性的(de)重要(yao)依(yi)據，也是產(chan)(chan)品注冊所需(xu)的(de)重要(yao)申報(bao)資(zi)料(liao)之(zhi)一(yi)(yi)。定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)(ce)方(fang)法(fa)的(de)回收實驗是評估(gu)準(zhun)(zhun)確度的(de)方(fang)法(fa)之(zhi)一(yi)(yi)，用(yong)于(yu)評估(gu)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)(ce)方(fang)法(fa)準(zhun)(zhun)確測(ce)(ce)定(ding)待測(ce)(ce)分析物的(de)能力，結果用(yong)回收率表示。
本指(zhi)導(dao)原(yuan)則基于國家食品(pin)藥品(pin)監(jian)督管理局《體外診斷試劑注(zhu)冊管理辦法(fa)（試行(xing)(xing)）》的有(you)關要求，參考有(you)關標(biao)準(zhun)，對采(cai)(cai)用回收(shou)實(shi)驗進(jin)行(xing)(xing)準(zhun)確(que)度(du)評估的實(shi)驗方法(fa)和數(shu)據處(chu)理方法(fa)進(jin)行(xing)(xing)了(le)原(yuan)則性要求。其目的是為生(sheng)產企業采(cai)(cai)用回收(shou)實(shi)驗方法(fa)進(jin)行(xing)(xing)準(zhun)確(que)度(du)評估并準(zhun)備準(zhun)確(que)度(du)評估資(zi)料提(ti)(ti)供(gong)原(yuan)則性指(zhi)導(dao)，也為注(zhu)冊管理部門審核該部分(fen)(fen)分(fen)(fen)析性能評估資(zi)料提(ti)(ti)供(gong)技術參考。
由(you)于(yu)體外診斷試(shi)劑(ji)產品發展(zhan)速(su)度(du)快、專業跨度(du)大，國(guo)家(jia)食(shi)品藥(yao)品監督管理局(ju)將根(gen)據體外診斷試(shi)劑(ji)發展(zhan)的需要，適時對本指導原則進行修(xiu)訂。
二、適用范圍
本(ben)指導(dao)原則(ze)適(shi)用于(yu)首次(ci)申請(qing)(qing)注冊、申請(qing)(qing)許可(ke)事項變更(geng)的(de)用于(yu)定量檢測的(de)體(ti)外(wai)診斷(duan)產品。因(yin)體(ti)外(wai)診斷(duan)產品評(ping)(ping)價是將儀器、試劑、質控品、校準品等作(zuo)為(wei)一個系(xi)統進行評(ping)(ping)價，因(yin)此回收實驗的(de)評(ping)(ping)價采(cai)用系(xi)統的(de)概念進行描(miao)述。如特(te)殊產品不適(shi)用于(yu)本(ben)指導(dao)原則(ze)，可(ke)進行詳細說明并(bing)采(cai)用適(shi)當的(de)方法進行準確度評(ping)(ping)價。
三、基本要求
（一(yi)）回(hui)收實驗的基本要求
1.操(cao)作(zuo)者應熟悉待評價(jia)系統的(de)操(cao)作(zuo)。
2.編寫系(xi)統標準(zhun)操作(zuo)規程，其中(zhong)包括校(xiao)準(zhun)程序和室(shi)內(nei)質(zhi)控(kong)(kong)程序，采(cai)用(yong)合適的(de)校(xiao)準(zhun)品(pin)、質(zhi)控(kong)(kong)品(pin)并(bing)保持系(xi)統處(chu)于正(zheng)常狀(zhuang)態。
3.待(dai)(dai)評(ping)(ping)價(jia)系統(tong)的處(chu)理。進(jin)行(xing)回收(shou)實(shi)驗前(qian)，應(ying)該對(dui)待(dai)(dai)評(ping)(ping)價(jia)系統(tong)進(jin)行(xing)初步評(ping)(ping)價(jia)，并且對(dui)待(dai)(dai)評(ping)(ping)價(jia)系統(tong)進(jin)行(xing)精密(mi)度及線性(xing)評(ping)(ping)價(jia)（參(can)考相(xiang)關標準），只有在以上(shang)評(ping)(ping)價(jia)完成(cheng)并且符合相(xiang)關標準要求后，才可(ke)進(jin)行(xing)回收(shou)實(shi)驗。
（二(er)）回收實驗的評(ping)估及數據處理(li)方法
1.實驗樣(yang)本(ben)的(de)基本(ben)要求(qiu)和(he)制(zhi)備方法
（1）選擇合適濃度的(de)(de)常規檢測樣本，分為體積相同的(de)(de)3-4份。
（2）在其(qi)中2-3份樣(yang)本(ben)中加入不(bu)同(tong)濃(nong)度相同(tong)體(ti)積的(de)待(dai)測物標準液(ye)制備待(dai)回(hui)收(shou)(shou)分析樣(yang)本(ben)，加入體(ti)積小于原體(ti)積的(de)10%，制成2-3個不(bu)同(tong)加入濃(nong)度的(de)待(dai)回(hui)收(shou)(shou)分析樣(yang)本(ben)，計算加入的(de)待(dai)測物的(de)濃(nong)度。
（3）在另一(yi)份樣本(ben)中(zhong)加入同樣體積的(de)無待(dai)測(ce)物(wu)的(de)溶劑，制成基礎樣本(ben)。
2.實驗過程
用待評價系(xi)統對待回收分析樣(yang)(yang)本(ben)和基礎樣(yang)(yang)本(ben)進行(xing)(xing)(xing)測(ce)定(ding)，通常對樣(yang)(yang)本(ben)進行(xing)(xing)(xing)3次重復測(ce)定(ding)，計(ji)算均值，取其均值進行(xing)(xing)(xing)下述(shu)計(ji)算。
3.數(shu)據(ju)處理(li)及結果報告
（1）加(jia)入(ru)濃度n=標準(zhun)液(ye)濃度n×[標準(zhun)液(ye)加(jia)入(ru)體積/(樣本體積+標準(zhun)液(ye)體積)]
（2）計算回收(shou)率：
回收率n =
（3）計算平(ping)均回收率(lv)：
平均回收率 =
（4）計算每個樣(yang)本回(hui)收率與平均回(hui)收率的(de)差(cha)值：
每(mei)個樣本回收(shou)率(lv)與平(ping)均回收(shou)率(lv)的(de)差值＝回收(shou)率(lv)n－平(ping)均回收(shou)率(lv)
如差值超過(guo)±10%，應(ying)查(cha)找(zhao)原(yuan)因(yin)并糾正，重新進行(xing)評估。
（5）計算比例系(xi)統誤差(cha)：
比例系(xi)統誤差 = |100% - 平均回收率|
（6）結果評估：
結果(guo)至少應滿足相關國(guo)際及國(guo)家標準(zhun)，同時滿足臨床需(xu)求。
4.范例——某(mou)法測定血清葡(pu)萄糖回收(shou)率
（1）樣本制備：
①基礎樣本血清：血清1ml（葡萄糖(tang)濃(nong)度(du)5.5mmol/L）+蒸餾(liu)水0.1ml;
基(ji)礎樣(yang)本濃度＝5.5/(1+0.1)=5 mmol/L
②回收樣本1:血清1ml+0.1ml葡萄(tao)糖水溶(rong)液（濃度22mmol/L）;
③回收樣本(ben)2：血清1ml+0.1ml葡萄(tao)糖水溶液（濃度55mmol/L）。
（2）計算加入濃度：
加入濃度1＝22×[0.1/(0.1＋1.0)]＝2mmol/L
加入濃度2＝55×[0.1/(0.1＋1.0)]＝5mmol/L
（3）采用待評價(jia)系(xi)統，按照從低到高的濃度(du)順序，每個樣本測定3次(ci)，取平均值，填入表1。
表1
測定濃度mmol/L | 加入(ru)濃度(du)mmol/L | 回收濃度mmol/L | 回收率% | |
基礎樣本 | 5.00 | |||
分析樣本1 | 7.06 | 2.00 | 2.06 | 103 |
分析樣本2 | 9.95 | 5.00 | 4.95 | 99 |
回收濃度1＝7.06-5＝2.06mmol/L
回收濃度2＝9.95-5＝4.95mmol/L
回收(shou)率(lv)1＝＝103％
回收率2＝＝99％
（4）計算(suan)平(ping)均(jun)回(hui)收(shou)率：平(ping)均(jun)回(hui)收(shou)率 = = 101%。
（5）計(ji)算每個樣本回(hui)收率(lv)與平均回(hui)收率(lv)的差(cha)值：
分析(xi)樣本1:103％－101％＝2％
分析樣本2：99％－101％＝－2％
兩個樣本(ben)回(hui)收率(lv)與(yu)平均回(hui)收率(lv)的差值小(xiao)于±10%，
（6）計算比例系統誤差(cha)：
比例系統誤差(cha) = |100% - 101%| = ;1%
（7）結果(guo)評估(gu)：1% （CLIA 88）, 該方(fang)法的回收實驗（準確度）可(ke)接受。
四、其他應注意的問題(ti)：
（一(yi)）加入(ru)體(ti)積(ji)：加入(ru)的待(dai)測物標(biao)準液體(ti)積(ji)一(yi)般(ban)在樣本體(ti)積(ji)的10%以(yi)內，如果(guo)高濃度(du)的待(dai)測物標(biao)準液不(bu)易得到(dao), 加入(ru)體(ti)積(ji)亦不(bu)得超過原樣本體(ti)積(ji)的20%。
加(jia)入的待測物(wu)標準液體積量不應(ying)影響樣本基質(zhi)；并且保證在加(jia)樣過(guo)程中的取(qu)樣準確度。
（二）加入的溶(rong)劑應不影響對待測物的測定(ding)。
（三）加(jia)入待測(ce)(ce)物(wu)標準(zhun)液的濃度(du)(du)：保證總濃度(du)(du)在系統分(fen)析測(ce)(ce)量范(fan)圍內，盡量使加(jia)入標準(zhun)液后樣本中的被測(ce)(ce)物(wu)濃度(du)(du)達到醫學(xue)決定水平。
（四）待測物標(biao)(biao)準液(ye)濃(nong)度(du)：因(yin)為(wei)待測物標(biao)(biao)準液(ye)溶(rong)液(ye)加入體積不到(dao)10%，為(wei)保證得(de)到(dao)不同濃(nong)度(du)的待回收(shou)分析樣本(ben)，標(biao)(biao)準液(ye)的濃(nong)度(du)應該足(zu)夠高。
五、名詞解釋(shi)
（一）待評價系(xi)統：擬進行性能評估(gu)的產品。
（二）待測物(wu)標準(zhun)液:待測物(wu)與相應的(de)(de)溶劑混合后制備的(de)(de)標準(zhun)液。
（三）基(ji)(ji)礎樣(yang)本(ben)：樣(yang)本(ben)與相應的(de)溶(rong)劑混合制(zhi)備成基(ji)(ji)礎樣(yang)本(ben)。
（四(si)）待(dai)回收分析(xi)樣本(ben)(ben)：樣本(ben)(ben)與相(xiang)應(ying)的待(dai)測物標(biao)準液混合制備(bei)成(cheng)待(dai)回收分析(xi)樣本(ben)(ben)。
六、參考文(wen)獻(xian)
《臨床(chuang)實驗室管理學(xue)》，申子瑜等，人(ren)民衛(wei)生出版社
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