腫瘤標志物類定量檢測(ce)試(shi)劑注冊(ce)申報資料指導(dao)原則
一、前言
本指(zhi)導原則旨在指(zhi)導注(zhu)冊申請(qing)人對腫瘤(liu)標(biao)志物類定量檢測試劑注(zhu)冊申報資料的(de)準備(bei)及撰寫，同時(shi)也為技(ji)術審評部門對注(zhu)冊申報資料的(de)技(ji)術審評提供參考(kao)。
本(ben)指導原則是(shi)對(dui)腫瘤(liu)標志物類定量檢測試劑的一般要(yao)求，申(shen)(shen)請人應(ying)依(yi)據具體產品的特性(xing)對(dui)注冊申(shen)(shen)報資料的內容進行充實和細(xi)化(hua)。申(shen)(shen)請人還應(ying)依(yi)據產品特性(xing)確定其(qi)中的具體內容是(shi)否適(shi)用，若(ruo)不(bu)適(shi)用，需具體闡(chan)述其(qi)理由及(ji)相應(ying)的科(ke)學依(yi)據。
本指(zhi)導原則(ze)是(shi)對申(shen)請人和審查人員的(de)指(zhi)導性(xing)文件，但不(bu)包括注冊(ce)審批(pi)所(suo)涉及的(de)行政事項，亦不(bu)作(zuo)為法規(gui)強制執行，如果有能夠滿足相(xiang)關法規(gui)要求的(de)其(qi)它方(fang)法，也可以采用(yong)，但需要提(ti)供詳細的(de)研究資料(liao)和驗證(zheng)資料(liao)。應(ying)在(zai)遵循(xun)相(xiang)關法規(gui)的(de)前提(ti)下使用(yong)本指(zhi)導原則(ze)。
本指導原則是在現行(xing)法規和(he)標(biao)準體系以及(ji)當前認知水平下制定的，隨著法規和(he)標(biao)準的不斷完善(shan)，以及(ji)科學技術的不斷發展(zhan)，本指導原則相關內容也將進行(xing)適時調整。
二、適用范圍
腫瘤標志物類(lei)定量檢測(ce)試(shi)劑是指利用(yong)各種方法學對人血清、血漿(jiang)或其它體液中的(de)腫瘤標志物進行體外定量分析的(de)試(shi)劑。本指導(dao)原則適用(yong)于進行首次注(zhu)冊申報和相(xiang)關許可事項變(bian)更的(de)產品。
從方法(fa)(fa)(fa)學(xue)(xue)(xue)考(kao)慮(lv)，本文主要指利用基于(yu)抗原抗體反應原理的免疫學(xue)(xue)(xue)方法(fa)(fa)(fa)對腫瘤標志物進行(xing)定量檢測(ce)的體外診斷(duan)試劑，如酶免疫法(fa)(fa)(fa)、化(hua)學(xue)(xue)(xue)發光法(fa)(fa)(fa)或(huo)微(wei)粒子酶免法(fa)(fa)(fa)等(deng)（不限(xian)于(yu)上述方法(fa)(fa)(fa)學(xue)(xue)(xue)），而不包括組(zu)織受體檢測(ce)、生物化(hua)學(xue)(xue)(xue)方法(fa)(fa)(fa)、免疫組(zu)化(hua)染色法(fa)(fa)(fa)、分子生物學(xue)(xue)(xue)方法(fa)(fa)(fa)類檢測(ce)試劑，有利之處可(ke)參考(kao)執(zhi)行(xing)。
三、基本要求
（一）綜述資料
綜(zong)述資料(liao)主要包括產品預(yu)期用途(tu)、產品描述、有(you)關(guan)生物安全(quan)性(xing)的(de)說明(ming)、研究結果的(de)總結評價以及同類產品上(shang)市情況(kuang)(kuang)介(jie)紹等內容，應符合《體外診斷試劑(ji)注(zhu)冊(ce)管理辦法（試行(xing)）》（以下簡稱《辦法》）和《體外診斷試劑(ji)注(zhu)冊(ce)申報資料(liao)基(ji)本要求》（國食藥監械[2007]609號）的(de)相關(guan)要求，下面著重介(jie)紹與腫瘤標志物類定量檢測試劑(ji)預(yu)期用途(tu)有(you)關(guan)的(de)臨(lin)床(chuang)背景(jing)情況(kuang)(kuang)。
理想的(de)腫瘤(liu)(liu)標(biao)(biao)志(zhi)物應具(ju)有(you)以下(xia)特性(xing)：靈敏度(du)高(gao)，便于(yu)腫瘤(liu)(liu)的(de)早期(qi)發現；特異性(xing)好，便于(yu)良(liang)、惡性(xing)腫瘤(liu)(liu)的(de)鑒別；良(liang)好的(de)器(qi)官(guan)特異性(xing)；與(yu)病情嚴重程度(du)、 腫瘤(liu)(liu)大小(xiao)或分(fen)期(qi)有(you)直接關(guan)系；監測治(zhi)(zhi)療效(xiao)果，腫瘤(liu)(liu)標(biao)(biao)志(zhi)物濃(nong)度(du)增高(gao)或降低與(yu)治(zhi)(zhi)療效(xiao)果相關(guan)；預(yu)測復發，疾病復發時腫瘤(liu)(liu)標(biao)(biao)志(zhi)物水平明顯異常。但至今尚(shang)沒(mei)有(you)一種腫瘤(liu)(liu)標(biao)(biao)志(zhi)物能(neng)完(wan)全滿足上述要(yao)求。目前，臨床常用腫瘤(liu)(liu)標(biao)(biao)志(zhi)物在(zai)用于(yu)惡性(xing)腫瘤(liu)(liu)的(de)臨床診(zhen)治(zhi)(zhi)時,靈敏度(du)和(he)特異性(xing)都不高(gao)，絕大多(duo)數腫瘤(liu)(liu)標(biao)(biao)志(zhi)物的(de)濃(nong)度(du)高(gao)低與(yu)腫瘤(liu)(liu)的(de)大小(xiao)、生長、惡性(xing)程度(du)以及分(fen)級/分(fen)期(qi)有(you)一定關(guan)聯但尚(shang)不能(neng)作為早期(qi)診(zhen)斷(duan)或確診(zhen)的(de)依據。
腫(zhong)瘤(liu)標(biao)志(zhi)物(wu)主(zhu)要用于(yu)惡(e)性(xing)(xing)腫(zhong)瘤(liu)患(huan)者(zhe)病(bing)(bing)(bing)情的(de)(de)(de)(de)(de)動(dong)態(tai)(tai)監(jian)測(ce)，不(bu)能(neng)(neng)作為早(zao)期(qi)診斷(duan)或確診依據，尚無足夠證據證明其可用于(yu)普(pu)通人群的(de)(de)(de)(de)(de)腫(zhong)瘤(liu)篩(shai)查(cha)。其濃(nong)度(du)(du)逐漸升高(gao)常(chang)意(yi)味著疾病(bing)(bing)(bing)處于(yu)不(bu)斷(duan)進(jin)展期(qi)或療(liao)(liao)效不(bu)佳，濃(nong)度(du)(du)降低(di)(di)則(ze)意(yi)味著對治(zhi)療(liao)(liao)有(you)反應(ying)(ying)或療(liao)(liao)效較好，而穩定(ding)的(de)(de)(de)(de)(de)抗原水(shui)平(ping)則(ze)常(chang)常(chang)暗示疾病(bing)(bing)(bing)處于(yu)穩定(ding)期(qi)。動(dong)態(tai)(tai)監(jian)測(ce)的(de)(de)(de)(de)(de)另一目的(de)(de)(de)(de)(de)是判斷(duan)殘留病(bing)(bing)(bing)灶(zao)(zao)、預測(ce)復發(fa)(fa)，腫(zhong)瘤(liu)標(biao)志(zhi)物(wu)濃(nong)度(du)(du)持續(xu)低(di)(di)水(shui)平(ping)地高(gao)于(yu)正常(chang)意(yi)味著可能(neng)(neng)有(you)殘留病(bing)(bing)(bing)灶(zao)(zao)的(de)(de)(de)(de)(de)存(cun)在(zai)，而短期(qi)內迅(xun)速(su)升高(gao)則(ze)往(wang)往(wang)是疾病(bing)(bing)(bing)復發(fa)(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)前兆。由于(yu)目前應(ying)(ying)用的(de)(de)(de)(de)(de)腫(zhong)瘤(liu)標(biao)志(zhi)物(wu)不(bu)能(neng)(neng)完全(quan)區分良惡(e)性(xing)(xing)疾病(bing)(bing)(bing)，即使濃(nong)度(du)(du)低(di)(di)于(yu)正常(chang)參考(kao)值也并(bing)不(bu)能(neng)(neng)排除惡(e)性(xing)(xing)疾病(bing)(bing)(bing)的(de)(de)(de)(de)(de)可能(neng)(neng)性(xing)(xing)，而在(zai)許多良性(xing)(xing)疾病(bing)(bing)(bing)卻可見這些標(biao)記物(wu)濃(nong)度(du)(du)水(shui)平(ping)的(de)(de)(de)(de)(de)升高(gao)，故在(zai)對惡(e)性(xing)(xing)腫(zhong)瘤(liu)患(huan)者(zhe)的(de)(de)(de)(de)(de)臨床診治(zhi)中，應(ying)(ying)結合(he)患(huan)者(zhe)的(de)(de)(de)(de)(de)癥狀/體征、其它實(shi)驗室檢測(ce)以及(ji)治(zhi)療(liao)(liao)情況等綜合(he)考(kao)慮。
（二）產品說明書
說(shuo)明(ming)書(shu)(shu)承載(zai)了產品預期用途、試(shi)(shi)驗方(fang)法、檢(jian)測結(jie)(jie)果(guo)解釋(shi)以及注意事(shi)項等重(zhong)(zhong)要(yao)(yao)信息(xi)，是指導(dao)實驗室(shi)工作(zuo)人員正確(que)(que)操作(zuo)、臨床(chuang)醫生針對檢(jian)驗結(jie)(jie)果(guo)給出合(he)(he)理醫學解釋(shi)的(de)重(zhong)(zhong)要(yao)(yao)依(yi)據，因(yin)此，產品說(shuo)明(ming)書(shu)(shu)是體外(wai)診斷試(shi)(shi)劑(ji)(ji)注冊申報最重(zhong)(zhong)要(yao)(yao)的(de)文(wen)(wen)(wen)件之(zhi)一(yi)。產品說(shuo)明(ming)書(shu)(shu)的(de)格式(shi)應(ying)(ying)符合(he)(he)《體外(wai)診斷試(shi)(shi)劑(ji)(ji)說(shuo)明(ming)書(shu)(shu)編寫指導(dao)原(yuan)則(ze)》的(de)要(yao)(yao)求，境(jing)外(wai)試(shi)(shi)劑(ji)(ji)的(de)中文(wen)(wen)(wen)說(shuo)明(ming)書(shu)(shu)除(chu)格式(shi)要(yao)(yao)求外(wai)，其內容應(ying)(ying)盡量保持與原(yuan)文(wen)(wen)(wen)說(shuo)明(ming)書(shu)(shu)的(de)一(yi)致(zhi)性，翻譯力求準確(que)(que)且符合(he)(he)中文(wen)(wen)(wen)表(biao)達習(xi)慣。
結(jie)合《體外(wai)診(zhen)斷試(shi)(shi)劑說明書編寫指(zhi)導原則》的要求(qiu)，下面對腫(zhong)瘤標志物類定(ding)量檢測試(shi)(shi)劑說明書的重(zhong)點內容進行(xing)詳細說明，以指(zhi)導注(zhu)冊(ce)申報(bao)人員更合理地完(wan)成說明書編制。
1.【預期用途】 應(ying)至(zhi)少包(bao)括以(yi)下幾部(bu)分內(nei)容：
（1）說明試劑盒用于定量檢測血清、血漿(jiang)和(he)/或其它體液中的某腫瘤標志物濃(nong)度；
（2）簡單介紹該腫瘤標志物的特征，如分子結構、分子量、產生和代謝(xie)主要途徑(jing)、半衰(shuai)期等(deng)；
（3） 腫瘤(liu)標(biao)志物(wu)水平升高常見于哪些良惡性(xing)疾(ji)病(bing)，組織/器官(guan)特異性(xing)如何，其(qi)升高或降低可能有哪些醫(yi)學解釋。
（4）強調：主要用于(yu)對惡(e)性腫(zhong)(zhong)瘤患者(zhe)進(jin)行動態監測以(yi)輔助(zhu)判(pan)斷疾病進(jin)程或(huo)治療效果，不能作(zuo)為惡(e)性腫(zhong)(zhong)瘤早期診斷或(huo)確診的(de)(de)依據，不宜(yi)用于(yu)普(pu)通人群的(de)(de)腫(zhong)(zhong)瘤篩查(cha)。
2.【主要組成成份】
（1）說明(ming)試劑盒包(bao)含組分(fen)的名稱、數(shu)量、比例(li)或濃度(du)等信息，如(ru)果對于正確(que)的操作很重要，應提(ti)供其生物(wu)學(xue)來源、活性及其他特性；明(ming)確(que)說明(ming)不同(tong)批號試劑盒中各(ge)組份是(shi)否可以互換。
（2）試(shi)劑(ji)盒內(nei)如包含校準(zhun)品和/或質控品，應(ying)說明其主要組成成份(fen)及其生(sheng)物學來源(yuan)(yuan)，校準(zhun)品應(ying)注明其定值及溯源(yuan)(yuan)性(xing)，質控品應(ying)有合適的靶值范(fan)圍。
（3） 試劑(ji)盒中不包含但對該(gai)項(xiang)檢測必(bi)須的組份，企業應列出(chu)相(xiang)關(guan)試劑(ji)的名(ming)稱、貨號及其他相(xiang)關(guan)信息。
3.【樣(yang)(yang)本(ben)要求(qiu)(qiu)(qiu)】 重點明確以下內容：樣(yang)(yang)本(ben)類型、處理、保存期限、保存條件(jian)(jian)（短期、長(chang)期）、運輸條件(jian)(jian)等。如有(you)血漿(jiang)樣(yang)(yang)本(ben)，應(ying)注(zhu)明對抗(kang)凝劑的(de)要求(qiu)(qiu)(qiu)。冷藏/冷凍(dong)樣(yang)(yang)本(ben)檢測前是(shi)否(fou)須恢復室溫，凍(dong)融次(ci)數。應(ying)詳(xiang)細描述(shu)對特(te)殊體液標本(ben)的(de)采集條件(jian)(jian)、保存液、容器等可能影(ying)響檢測結果的(de)要求(qiu)(qiu)(qiu)。
4.【適用(yong)機(ji)型】 注明所有(you)適用(yong)的儀器型號(hao)，并提供與儀器有(you)關(guan)的重(zhong)要信息以指導(dao)用(yong)戶操作(zuo)。
5.【檢驗方法】 詳(xiang)細說明試驗操作的各個步驟，包括：
（1）試(shi)劑配制方(fang)法、注意(yi)事項；
（2）試驗(yan)條件(jian)：溫度(du)、時間(jian)、儀(yi)器波長等以及試驗(yan)過程中的注(zhu)意事項；
（3）校準：校準品的使用方法、注意事項(xiang)、校準曲線的繪制。對需專用儀器(qi)的產品，應注明推(tui)薦的儀器(qi)校準周期。
（4）質量控(kong)(kong)制：質控(kong)(kong)品的(de)(de)使用方法(fa)、對質控(kong)(kong)結(jie)果(guo)的(de)(de)必(bi)要(yao)解(jie)釋以及推薦的(de)(de)質控(kong)(kong)周期等(deng)；建議在本部(bu)分注(zhu)明(ming)以下字樣：如果(guo)質控(kong)(kong)結(jie)果(guo)與預期不(bu)符，提示檢測結(jie)果(guo)不(bu)可靠(kao)，不(bu)應(ying)出具檢測報告。如質控(kong)(kong)不(bu)合格應(ying)提供相關的(de)(de)解(jie)決方案。
6.【產品性能(neng)指(zhi)標】 詳述以(yi)下性能(neng)指(zhi)標：
（1）最(zui)低檢(jian)出限（分析靈敏(min)度）：說明試劑(ji)的最(zui)低檢(jian)出濃度或不高于某濃度水(shui)平，簡單介紹確定(ding)方法，對功能靈敏(min)度如有研(yan)究可一并注明。
（2） 檢測(ce)范(fan)(fan)圍(wei)：本試劑盒可(ke)達到的(de)線性范(fan)(fan)圍(wei)、檢測(ce)范(fan)(fan)圍(wei)或(huo)可(ke)報告(gao)范(fan)(fan)圍(wei)，儀器報告(gao)結果的(de)高限(xian)和(he)低限(xian)要(yao)求(qiu)（如(ru)有）等；
（3） 精(jing)密(mi)度(du)：簡要說(shuo)明精(jing)密(mi)度(du)評價的方法，建議以列表的方式列出批(pi)內/批(pi)間(jian)、日(ri)內/日(ri)間(jian)、運行內/運行間(jian)精(jing)密(mi)度(du)等信息，以標準差（SD）和(he)變(bian)異系數（CV）的形式表示(shi)；
（4） 特(te)異(yi)性(xing)(xing)：有關(guan)(guan)(guan)干(gan)擾或(huo)交叉反(fan)應(ying)的(de)研究(jiu)。常見的(de)特(te)異(yi)性(xing)(xing)研究(jiu)包括：對溶血、高脂、黃疸(dan)等(deng)干(gan)擾因子(zi)研究(jiu)（結果應(ying)量化表(biao)示，禁用輕度、嚴重(zhong)等(deng)模糊表(biao)述(shu)），有關(guan)(guan)(guan)自身抗體、易共存或(huo)結構(gou)相(xiang)似的(de)不(bu)同腫瘤(liu)標志物間、抗腫瘤(liu)藥物特(te)異(yi)性(xing)(xing)（如(ru)某些生物制劑(ji)）的(de)研究(jiu)，如(ru)未進(jin)行相(xiang)關(guan)(guan)(guan)研究(jiu)也應(ying)提供相(xiang)關(guan)(guan)(guan)警(jing)示說明。
（5） Hook（鉤狀）效應(ying)：說明(ming)不會產生Hook效應(ying)的濃度上限或相關研究，如需稀釋，應(ying)注明(ming)對稀釋液(ye)的要求(qiu)、最佳(jia)或最大稀釋比例。
（6） 對(dui)比(bi)試驗(yan)研究(jiu)（如有）：簡要介紹(shao)參比(bi)試劑的(de)信息(xi)、所(suo)采用(yong)的(de)統計學(xue)方法等，對(dui)比(bi)結果(guo)可(ke)以(yi)回(hui)歸方程、判定系數(shu)的(de)形式表示。
（7） 建(jian)議采(cai)用國(guo)際標準(zhun)濃度(du)單位表示腫瘤標志(zhi)物濃度(du)，如涉(she)及不(bu)同(tong)單位，如U/ml、ng/ml、mg/l等，應(ying)注明不(bu)同(tong)單位間的換算關系。
7.【參考值(zhi)（范圍）】
應注(zhu)明(ming)常用樣本類型的正常參考(kao)值（范圍(wei)），簡單介紹(shao)設(she)定該(gai)參考(kao)值（范圍(wei)）所選健(jian)康人(ren)(ren)群的區域特征，建(jian)議(yi)(yi)注(zhu)明(ming)以下字樣“由(you)于地理、人(ren)(ren)種、性別及年(nian)齡等差異，建(jian)議(yi)(yi)各實(shi)驗室建(jian)立自己(ji)的參考(kao)值（范圍(wei)）”。
8.【注(zhu)意事項(xiang)】應至少包(bao)括(kuo)以下內容：
（1） 本試(shi)劑盒的檢測結果僅供(gong)臨床(chuang)參考，對患者(zhe)的臨床(chuang)診治(zhi)(zhi)應(ying)(ying)結合其癥狀/體征、病(bing)史、其它實(shi)驗室檢查及治(zhi)(zhi)療反應(ying)(ying)等情況綜合考慮。
（2） 由于方法學(xue)或抗體特異性等原(yuan)因(yin)，使用不(bu)(bu)同(tong)生產(chan)商的(de)(de)試(shi)劑(ji)(ji)(ji)對同(tong)一份樣(yang)本進行(xing)(xing)腫(zhong)瘤(liu)標記物檢(jian)測(ce)(ce)(ce)可能(neng)會得到不(bu)(bu)同(tong)的(de)(de)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)結(jie)果，因(yin)此，在(zai)腫(zhong)瘤(liu)監(jian)測(ce)(ce)(ce)過程中，用不(bu)(bu)同(tong)試(shi)劑(ji)(ji)(ji)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)所得結(jie)果不(bu)(bu)應直(zhi)接相互(hu)比較(jiao)，以(yi)免(mian)造成錯誤的(de)(de)醫學(xue)解釋；建議(yi)實驗(yan)室(shi)在(zai)發(fa)給臨床醫生的(de)(de)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)報告注(zhu)明所用試(shi)劑(ji)(ji)(ji)特征(zheng)。系列監(jian)測(ce)(ce)(ce)中如(ru)果改變試(shi)劑(ji)(ji)(ji)類型，則應進行(xing)(xing)額外的(de)(de)連續性檢(jian)測(ce)(ce)(ce)并與原(yuan)有試(shi)劑(ji)(ji)(ji)結(jie)果進行(xing)(xing)平(ping)行(xing)(xing)比較(jiao)以(yi)重新確定基線值。
（3）有關人源(yuan)(yuan)組(zu)份的(de)(de)警告(gao)，如(ru)：試劑(ji)盒內(nei)的(de)(de)質控品(pin)、校準品(pin)或其它人源(yuan)(yuan)組(zu)份，雖已經通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等項目(mu)的(de)(de)檢測，但截(jie)至目(mu)前，沒有任何一項檢測可(ke)以確保(bao)絕對安(an)全，故仍應將這些(xie)組(zu)份作為潛在(zai)傳染源(yuan)(yuan)對待(dai)。
（4）樣本(ben)：采集時間(jian)要求(qiu)、與用(yong)藥的先(xian)后(hou)順(shun)序或用(yong)藥后(hou)時間(jian)間(jian)隔等；對所有樣本(ben)和反應廢(fei)棄(qi)物都應視為傳染源對待。
（5）其它有關(guan)不同腫瘤標(biao)志(zhi)物特性(xing)的注(zhu)意事項
（三(san)）擬定產品標準及編(bian)制說(shuo)明
擬定產(chan)品(pin)標準應(ying)符合(he)《辦法(fa)》和《體外診斷試劑(ji)注冊申報(bao)資料(liao)基本要求》的(de)相關規定。另外，對于(yu)國(guo)產(chan)第三(san)類體外診斷試劑(ji)產(chan)品(pin)，應(ying)參考《中(zhong)(zhong)國(guo)生物(wu)制品(pin)規程》（2000年版(ban)），將擬申報(bao)產(chan)品(pin)的(de)主要原材料(liao)、生產(chan)工藝(yi)及半成品(pin)檢(jian)定等內(nei)容作為附錄附于(yu)標準正文后，并在(zai)正文的(de)“產(chan)品(pin)分類”項中(zhong)(zhong)引出該附錄內(nei)容。
作為(wei)定量檢測(ce)(ce)試(shi)劑，腫(zhong)瘤標(biao)志物(wu)產品的(de)(de)(de)注冊檢測(ce)(ce)應(ying)主要包括以(yi)下性能指(zhi)標(biao)：準(zhun)(zhun)確度、精密度、最低檢測(ce)(ce)限（分析靈(ling)敏(min)度）、線性范圍等。如果擬申報試(shi)劑屬(shu)于《中國生物(wu)制品規程》（2000年版）收(shou)錄(lu)的(de)(de)(de)項目(mu)或已有相應(ying)的(de)(de)(de)國家/行業標(biao)準(zhun)(zhun)發布，則企(qi)業標(biao)準(zhun)(zhun)的(de)(de)(de)要求不得低于上述(shu)標(biao)準(zhun)(zhun)要求。
（四）注冊檢測
根據《辦法》要求(qiu)，首次申請(qing)注(zhu)(zhu)冊的(de)(de)(de)第三類產(chan)(chan)品(pin)(pin)(pin)應(ying)該(gai)在(zai)國(guo)家食品(pin)(pin)(pin)藥品(pin)(pin)(pin)監督管理局認可的(de)(de)(de)、具有相應(ying)承檢(jian)范圍的(de)(de)(de)醫療器械檢(jian)測(ce)機構進行(xing)連續三個生產(chan)(chan)批次樣品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)(de)注(zhu)(zhu)冊檢(jian)測(ce)。對于已經(jing)有國(guo)家標(biao)準品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)(de)腫瘤(liu)標(biao)志物項目(mu)，在(zai)注(zhu)(zhu)冊檢(jian)測(ce)時應(ying)采用(yong)相應(ying)的(de)(de)(de)國(guo)家標(biao)準品(pin)(pin)(pin)進行(xing),對于目(mu)前尚無國(guo)家標(biao)準品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)(de)項目(mu)，生產(chan)(chan)企業應(ying)建立自己的(de)(de)(de)標(biao)準體系并提(ti)供相應(ying)的(de)(de)(de)標(biao)準品(pin)(pin)(pin)。
（五）主要原(yuan)材(cai)料(liao)研究(jiu)資料(liao)
主(zhu)要原材料（包(bao)(bao)括抗(kang)原、抗(kang)體及(ji)其(qi)它(ta)主(zhu)要原料）的(de)選擇、制備、質(zhi)量標(biao)準(zhun)及(ji)實(shi)驗(yan)驗(yan)證研究資料；質(zhi)控品(pin)、校(xiao)(xiao)準(zhun)品(pin)的(de)原料選擇、制備、定值過程(cheng)及(ji)試驗(yan)資料；校(xiao)(xiao)準(zhun)品(pin)的(de)溯源性文(wen)件，包(bao)(bao)括具體溯源鏈、實(shi)驗(yan)方(fang)法、數據及(ji)統計分析等詳細資料。
（六(liu)）主要生產工藝及反應(ying)體系(xi)的研究資料
1.主要生產工藝介紹，可以(yi)圖表方式(shi)表示(shi)；
2.反(fan)應原理(li)（如雙(shuang)抗體夾心法）介(jie)紹；
3.固(gu)相載體、顯色（發光）系統(tong)、酶作用(yong)底物等的介紹；
4.確定抗(kang)原(yuan)抗(kang)體(ti)反(fan)應條件（溫度、時間(jian)、pH值(zhi)等(deng)）的研究資(zi)料；
5.確定反應所需物(wu)(wu)質用量（校準品、樣本、包被(bei)物(wu)(wu)、酶(mei)標物(wu)(wu)、底物(wu)(wu)等）的研究資料(liao)；
6.酶催化底物（發光或變(bian)色）的(de)最適條(tiao)件研究；
7.其它：如清(qing)洗次(ci)數、基質液(ye)的選擇、樣本稀釋等；
8.不(bu)同適(shi)用機型的反(fan)應條(tiao)件如果有差異應分別詳述(shu)。
（七）分析性能評估資料
企(qi)業應提交原廠在(zai)產品研(yan)制階段對試(shi)劑盒進行(xing)的所有性能驗證的研(yan)究資料(liao)，包括具體研(yan)究方法、試(shi)驗數據、統計方法等詳(xiang)細資料(liao)。對于(yu)腫瘤標(biao)志物(wu)類(lei)定(ding)量檢(jian)測(ce)試(shi)劑，建議著重(zhong)對以下(xia)分析性能進行(xing)研(yan)究。
1.準確度
對測(ce)量(liang)準確(que)度的(de)(de)評價依次包括：與國家標準品(pin)（和/或國際(ji)標準品(pin)）的(de)(de)偏(pian)差分析、回(hui)收實驗、方(fang)法學比對等(deng)方(fang)法，企(qi)業可根據實際(ji)情況(kuang)選擇合理方(fang)法進行研究。
（1） 與國(guo)家（國(guo)際）標準品(pin)的(de)比(bi)對研究
如果研究項目有相(xiang)應國家（國際）標(biao)準品(pin)(pin)，則使用國家（國際）標(biao)準品(pin)(pin)進行(xing)驗證，重點觀察對相(xiang)應標(biao)準品(pin)(pin)檢測結果的偏差情況。
（2） 回收試驗
用于評(ping)估(gu)定量(liang)檢測方法準確測定加入純分析物的能力，結果(guo)用回收(shou)率表示。通(tong)常對樣(yang)本進行2-3次(ci)回收(shou)試驗，取平(ping)(ping)均值即平(ping)(ping)均回收(shou)率。
回收試驗注意事項：
① 加(jia)入的標準液體積一般應(ying)小于樣本體積的10%；
② 盡量使加入標準液后樣本中的被測(ce)物濃度接近醫學決定水平；
③ 標準物(wu)濃(nong)(nong)度(du)應該足夠高，以得到不同濃(nong)(nong)度(du)的回(hui)收樣本；
④ 注意基(ji)質(zhi)效應，盡量采用與臨床待(dai)測樣本接近的(de)基(ji)質(zhi)。
（3） 方法學比(bi)對(dui)
采用(yong)參考方(fang)法或國內/國際(ji)普(pu)遍認為質(zhi)量較好(hao)的(de)(de)已上市同(tong)(tong)類試(shi)(shi)劑(ji)作為參比方(fang)法，與(yu)擬申(shen)報(bao)試(shi)(shi)劑(ji)同(tong)(tong)時檢測一(yi)批病人樣(yang)品(pin)，從測定結(jie)果(guo)間(jian)的(de)(de)差異了(le)解擬申(shen)報(bao)試(shi)(shi)劑(ji)與(yu)參比方(fang)法間(jian)的(de)(de)偏(pian)倚。如(ru)偏(pian)倚很(hen)小或在允許的(de)(de)誤差范圍內，說(shuo)明兩檢測系統對(dui)病人標本測定結(jie)果(guo)基本相(xiang)符，對(dui)同(tong)(tong)一(yi)份臨(lin)床樣(yang)本的(de)(de)醫學解釋，擬申(shen)報(bao)試(shi)(shi)劑(ji)與(yu)參比方(fang)法相(xiang)比不會產生差異結(jie)果(guo)。
在實施(shi)方法學比(bi)對(dui)前，應分(fen)(fen)別對(dui)擬(ni)申(shen)報(bao)試劑(ji)和參比(bi)試劑(ji)進(jin)行(xing)初(chu)步評估，只有在確(que)認兩者都分(fen)(fen)別符合(he)各(ge)自相關的(de)質(zhi)量標準后方可(ke)進(jin)行(xing)比(bi)對(dui)試驗。方法學比(bi)對(dui)時(shi)應注意質(zhi)量控制、樣(yang)本(ben)類型、濃度分(fen)(fen)布范(fan)圍(wei)并對(dui)結果進(jin)行(xing)合(he)理的(de)統(tong)計學分(fen)(fen)析。
2.精密度
測量(liang)精密度的(de)評估(gu)應至(zhi)少包(bao)括(kuo)兩(liang)個(ge)濃(nong)度水平的(de)樣(yang)本進行(xing)，兩(liang)個(ge)濃(nong)度都應在試劑(ji)盒的(de)測量(liang)范(fan)圍內且有一定的(de)臨床(chuang)意義（醫學決定水平），通常(chang)選(xuan)(xuan)用(yong)(yong)該檢測指標(biao)的(de)正常(chang)參考值(zhi)（范(fan)圍）附近(jin)和(he)異常(chang)高(gao)值(zhi)樣(yang)本。兩(liang)個(ge)濃(nong)度都選(xuan)(xuan)用(yong)(yong)高(gao)值(zhi)樣(yang)品，可(ke)能致CV偏小，也不(bu)能選(xuan)(xuan)用(yong)(yong)接近(jin)最(zui)低檢出限的(de)樣(yang)品，可(ke)能致CV偏大，而且絕大多(duo)數腫瘤標(biao)志物的(de)極低值(zhi)并無實際臨床(chuang)意義。
測(ce)量精(jing)密度的(de)(de)評(ping)價方法(fa)并無(wu)統一的(de)(de)標準可依，可根據(ju)不同(tong)的(de)(de)試(shi)劑特(te)征或企(qi)業的(de)(de)研究習(xi)慣進(jin)行(xing)，前提是必須(xu)保證研究的(de)(de)科學合理性(xing)。具體實驗方法(fa)可以參考相關(guan)的(de)(de)CLSI-EP文件(jian)或國內有(you)關(guan)體外診斷產品性(xing)能(neng)評(ping)估的(de)(de)文件(jian)進(jin)行(xing)。
3.線性范圍
建立試(shi)劑線性范圍(wei)所用(yong)的(de)(de)(de)(de)樣(yang)本基質應盡可能與臨床實際檢測的(de)(de)(de)(de)樣(yang)本相似，理(li)想的(de)(de)(de)(de)樣(yang)本為分析(xi)物濃(nong)度(du)(du)(du)接近預(yu)期測定(ding)上限(xian)的(de)(de)(de)(de)混合(he)人(ren)血清，且應充分考(kao)慮多(duo)倍稀釋對(dui)樣(yang)本基質的(de)(de)(de)(de)影響。建立一(yi)種定(ding)量(liang)測定(ding)方法的(de)(de)(de)(de)線性范圍(wei)時，需(xu)在(zai)(zai)預(yu)期測定(ding)范圍(wei)內選(xuan)擇7-11個(ge)濃(nong)度(du)(du)(du)水平(ping)。例如，將預(yu)期測定(ding)范圍(wei)加寬(kuan)至130%，在(zai)(zai)此范圍(wei)內選(xuan)擇更(geng)多(duo)的(de)(de)(de)(de)濃(nong)度(du)(du)(du)水平(ping)，然后依據實驗(yan)結果逐漸減少數據點(dian)直至表現(xian)出(chu)線性關系(xi)，可發現(xian)最寬(kuan)的(de)(de)(de)(de)線性范圍(wei)。
4.最低檢(jian)測限(xian)（分析靈敏度）
最低(di)(di)檢測限的(de)(de)確(que)定常使用同(tong)批號(hao)試劑對零濃(nong)度(du)校準(zhun)品(pin)（或樣品(pin)稀釋(shi)液）進行至(zhi)少20次(ci)重復檢測，平均值(zhi)加（或減）2倍SD（≥95%置信(xin)區間）即試劑的(de)(de)最低(di)(di)檢測限。
5.特異性
（1） 溶血（血紅(hong)蛋白）、高脂、高膽紅(hong)素(su)等干擾(rao)(rao)因素(su)對檢測結果的影(ying)響及相(xiang)關干擾(rao)(rao)因子的高限值。
（2） 自身抗體影(ying)響，如RF、ANA等。
（3） 樣本中存在(zai)的(de)某些(xie)與待(dai)測(ce)抗(kang)(kang)原有相似化學結構(gou)或抗(kang)(kang)原表位的(de)分子，可能與試劑中的(de)單克隆抗(kang)(kang)體發(fa)生交(jiao)叉(cha)反(fan)應而影響檢測(ce)結果，如易共存的(de)其它腫瘤標志物抗(kang)(kang)原、某些(xie)激素(su)、近期使用的(de)抗(kang)(kang)腫瘤藥(yao)物、人抗(kang)(kang)鼠抗(kang)(kang)體（HAMA）等。
6.高濃度Hook效應及樣本稀釋
Hook效(xiao)應通常指在雙抗(kang)體夾心(xin)實(shi)驗中(zhong)，由于標本中(zhong)受(shou)檢抗(kang)原的含(han)量過高，過量抗(kang)原分別與固相抗(kang)體和酶標抗(kang)體結合(he)，而(er)不再形(xing)成(cheng)“夾心(xin)復合(he)物”，從而(er)影響檢測(ce)結果，將(jiang)高濃度錯誤報(bao)告為低濃度，出現(xian)高濃度后帶現(xian)象，又稱(cheng)“鉤狀效(xiao)應”，在一步(bu)法操(cao)作更常見。
企業(ye)應(ying)對一些極高值(zhi)樣本(ben)進(jin)行相關研究(jiu)，以驗證(zheng)產生Hook效應(ying)的高限值(zhi)。過度(du)稀釋(shi)(shi)可能產生明顯的基質效應(ying)，企業(ye)應(ying)對樣本(ben)稀釋(shi)(shi)液(ye)、合理的稀釋(shi)(shi)比例做相關研究(jiu)以確(que)認最(zui)佳(jia)稀釋(shi)(shi)條件。
7.其它需注意問題
對于適用多個機(ji)型(xing)的產品(pin)，應提(ti)供如產品(pin)說明書【適用機(ji)型(xing)】項中所(suo)列(lie)的所(suo)有型(xing)號儀器的性能評估資料。
試劑盒(he)的(de)(de)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)類型(xing)如(ru)包括血(xue)清和(he)血(xue)漿(jiang)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)，則應(ying)對二者進(jin)行(xing)相(xiang)關(guan)性研究(jiu)以(yi)(yi)確(que)認二者檢(jian)(jian)測(ce)結果是否(fou)完全一致或(huo)存在某種相(xiang)關(guan)性（如(ru)系(xi)數(shu)關(guan)系(xi)）。對于血(xue)漿(jiang)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)，企業應(ying)對不同(tong)的(de)(de)抗凝劑進(jin)行(xing)研究(jiu)以(yi)(yi)確(que)認最適(shi)的(de)(de)抗凝條件以(yi)(yi)及是否(fou)會干擾檢(jian)(jian)測(ce)結果。
（八）參考值(zhi)（范圍）確定資料
參考值（范(fan)圍）確定(ding)(ding)所采(cai)用的(de)樣本來(lai)源、確定(ding)(ding)方法及詳細的(de)試驗(yan)資料。建(jian)議采(cai)用受(shou)試者(zhe)工(gong)作特征（ROC）曲線方法確定(ding)(ding)擬申報腫瘤標志物的(de)參考值（范(fan)圍）。
（九）穩定性研究資料
穩(wen)定(ding)(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing)研(yan)究(jiu)主要包括(kuo)(kuo)實(shi)時穩(wen)定(ding)(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing)、高溫加(jia)速破壞穩(wen)定(ding)(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing)、運輸穩(wen)定(ding)(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing)、上(shang)機(ji)穩(wen)定(ding)(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing)及(ji)開(kai)瓶（復溶）穩(wen)定(ding)(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing)等，企業可根據實(shi)際需要選(xuan)擇合理(li)的穩(wen)定(ding)(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing)研(yan)究(jiu)方(fang)案。穩(wen)定(ding)(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing)研(yan)究(jiu)資料應(ying)包括(kuo)(kuo)研(yan)究(jiu)方(fang)法(fa)的確(que)定(ding)(ding)(ding)依據、具體方(fang)法(fa)及(ji)過程。對于實(shi)時穩(wen)定(ding)(ding)(ding)性(xing)(xing)(xing)(xing)研(yan)究(jiu)，應(ying)提供至(zhi)少3批樣品在實(shi)際儲存條件下保存至(zhi)成品有效期后(hou)的研(yan)究(jiu)資料。
（十）臨床試驗研究
1.研究方法
（1） 已有同類(lei)產品(pin)上(shang)市(shi)的臨床研究
選擇(ze)境內已(yi)批準上市、臨床普遍認為質(zhi)量(liang)較好的同類產品(pin)作為參(can)比(bi)(bi)試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)，采用擬申報產品(pin)（以下稱(cheng)考(kao)核試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)）與之進行對(dui)比(bi)(bi)試(shi)(shi)(shi)驗(yan)研究，證(zheng)明本品(pin)與已(yi)上市產品(pin)等效或優于已(yi)上市產品(pin)。建議企業盡量(liang)選擇(ze)方法學相同、線性范圍及(ji)精密度等性能接近的同類試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)作為參(can)比(bi)(bi)試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)。
（2） 新腫(zhong)瘤標志物(wu)檢測(ce)試劑的臨床研究
對于無法選(xuan)擇(ze)參比(bi)試劑(ji)的(de)新腫(zhong)瘤標記物而(er)言(yan)，其臨(lin)床(chuang)研(yan)究應選(xuan)擇(ze)多個(ge)相(xiang)關的(de)良惡性疾病組及(ji)部(bu)分正常人群，驗(yan)證(zheng)新標記物的(de)臨(lin)床(chuang)靈敏度和特異性，并利用ROC曲線(xian)確定(ding)合(he)適的(de)參考值（范圍）。另外，還(huan)應對至少100例特定(ding)的(de)惡性腫(zhong)瘤患(huan)者(zhe)進行治療(liao)(liao)前(qian)后的(de)隨(sui)(sui)訪監測研(yan)究，以驗(yan)證(zheng)新腫(zhong)瘤標記物濃度變化與患(huan)者(zhe)病情變化的(de)相(xiang)關性。臨(lin)床(chuang)隨(sui)(sui)訪監測研(yan)究應結合(he)臨(lin)床(chuang)治療(liao)(liao)措施(shi)的(de)選(xuan)擇(ze)（公認有(you)效的(de)治療(liao)(liao)手段）、患(huan)者(zhe)治療(liao)(liao)后恢復狀況、腫(zhong)瘤標志物代謝周期（半衰(shuai)期）等因素綜合(he)考慮(lv)。患(huan)者(zhe)采樣(yang)的(de)時(shi)間(jian)點視臨(lin)床(chuang)需要(yao)而(er)定(ding)，申請人不(bu)得(de)隨(sui)(sui)意干涉。
2.臨床研究單位的選(xuan)擇
建議在國內不同城市選擇臨(lin)床單(dan)(dan)(dan)位(wei)，盡(jin)量(liang)使(shi)各(ge)單(dan)(dan)(dan)位(wei)的(de)臨(lin)床樣本有(you)一定地(di)域(yu)代表(biao)性；臨(lin)床研究單(dan)(dan)(dan)位(wei)應(ying)(ying)具(ju)有(you)腫(zhong)瘤疾病診療的(de)優勢，實(shi)驗(yan)操作人員(yuan)應(ying)(ying)有(you)足夠(gou)的(de)時間熟悉檢(jian)測系統的(de)各(ge)環(huan)節(jie)（儀器、試(shi)劑(ji)、質控及操作程序等(deng)），熟悉評價(jia)方(fang)案。在整個(ge)實(shi)驗(yan)中，考核試(shi)劑(ji)和(he)參比試(shi)劑(ji)都應(ying)(ying)處于有(you)效的(de)質量(liang)控制下，定期對(dui)儀器進(jin)行校(xiao)準(zhun)，最大限(xian)度(du)保證試(shi)驗(yan)數據的(de)準(zhun)確性及可重復性。
3.臨床試驗方案
臨(lin)床(chuang)(chuang)試驗(yan)實(shi)施前，研(yan)(yan)究人(ren)(ren)員(yuan)應從流行(xing)病學(xue)、統計學(xue)、臨(lin)床(chuang)(chuang)醫(yi)學(xue)、檢(jian)驗(yan)醫(yi)學(xue)等多方面(mian)考慮，設計科學(xue)合理(li)的(de)臨(lin)床(chuang)(chuang)研(yan)(yan)究方案。各臨(lin)床(chuang)(chuang)研(yan)(yan)究機構的(de)方案設置應基本(ben)一致，且(qie)保證在整(zheng)個臨(lin)床(chuang)(chuang)試驗(yan)過程(cheng)中遵(zun)循(xun)預定的(de)方案實(shi)施，不(bu)可隨意(yi)改動。整(zheng)個試驗(yan)過程(cheng)應在臨(lin)床(chuang)(chuang)研(yan)(yan)究機構的(de)實(shi)驗(yan)室內并(bing)由(you)本(ben)實(shi)驗(yan)室的(de)技(ji)術(shu)(shu)人(ren)(ren)員(yuan)操作(zuo)完(wan)成，申報單位的(de)技(ji)術(shu)(shu)人(ren)(ren)員(yuan)除進行(xing)必要的(de)技(ji)術(shu)(shu)指(zhi)導(dao)外，不(bu)得隨意(yi)干涉實(shi)驗(yan)進程(cheng)，尤其是數(shu)據收集過程(cheng)。
試驗(yan)方案中(zhong)應(ying)確定嚴格的(de)(de)(de)病(bing)例納入(ru)/排(pai)除標準(zhun)，任(ren)何(he)已經入(ru)選的(de)(de)(de)病(bing)例再被排(pai)除出臨(lin)(lin)床研(yan)究(jiu)都應(ying)記(ji)錄在案并(bing)明確說明原(yuan)因。在試驗(yan)操作(zuo)過程中(zhong)和判(pan)定試驗(yan)結(jie)果(guo)時應(ying)采用盲法以保證試驗(yan)結(jie)果(guo)的(de)(de)(de)客觀性。對于新試劑的(de)(de)(de)動態監測(ce)研(yan)究(jiu)，應(ying)在方案中(zhong)明確前后兩次濃度變化有臨(lin)(lin)床意義的(de)(de)(de)標準(zhun)。臨(lin)(lin)床試驗(yan)中(zhong)所(suo)涉及的(de)(de)(de)樣(yang)本類型應(ying)與產品說明書一致，且每種樣(yang)本類型例數的(de)(de)(de)選擇應(ying)符合(he)(he)基本的(de)(de)(de)統計學要(yao)求。各研(yan)究(jiu)單(dan)位選用的(de)(de)(de)參(can)比試劑及所(suo)用機型應(ying)完全一致，以便(bian)進行合(he)(he)理的(de)(de)(de)統計學分析。
4.臨床病例選擇
如上(shang)文所(suo)述，絕大多數腫(zhong)瘤(liu)標志物對(dui)(dui)于惡(e)性(xing)腫(zhong)瘤(liu)診斷的(de)(de)(de)靈(ling)敏度和特異性(xing)較低，器(qi)官(guan)定位及(ji)對(dui)(dui)疾(ji)(ji)病良惡(e)性(xing)的(de)(de)(de)區分能力都(dou)較差。因此，在進行(xing)臨(lin)床研究時，除(chu)選(xuan)擇(ze)(ze)目的(de)(de)(de)器(qi)官(guan)/組(zu)織(zhi)(zhi)惡(e)性(xing)疾(ji)(ji)病的(de)(de)(de)病例外，還應選(xuan)擇(ze)(ze)其它器(qi)官(guan)/組(zu)織(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)惡(e)性(xing)病患者(zhe)、相關的(de)(de)(de)良性(xing)病例等。另(ling)外，孕婦或(huo)處于生理周期女性(xing)亦可見某些(xie)激素或(huo)胚胎蛋白類(lei)腫(zhong)瘤(liu)標志物的(de)(de)(de)水平升(sheng)高，對(dui)(dui)于此類(lei)腫(zhong)瘤(liu)標志物，臨(lin)床研究中應選(xuan)擇(ze)(ze)部分相關樣本作為受試對(dui)(dui)象。
臨(lin)(lin)床(chuang)研究應包(bao)括對(dui)(dui)部分來自正常健康人(ren)群的樣本作為(wei)正常對(dui)(dui)照。比較正常組和疾(ji)病組結果，以便(bian)對(dui)(dui)申報(bao)產品的臨(lin)(lin)床(chuang)性能做出全面分析(xi)。建議(yi)對(dui)(dui)健康人(ren)群例數的選(xuan)(xuan)擇(ze)以不超(chao)過150例為(wei)宜。對(dui)(dui)于新的腫瘤標(biao)志物或臨(lin)(lin)床(chuang)意義有(you)待進一(yi)步明(ming)確(que)的項目，應提供(gong)足(zu)夠臨(lin)(lin)床(chuang)證據證明(ming)其(qi)臨(lin)(lin)床(chuang)預期用途。不管是健康人(ren)群或不同病種的患者(zhe)，每一(yi)組受試者(zhe)的最小入選(xuan)(xuan)人(ren)數均須(xu)滿足(zu)統計學分析(xi)的基(ji)本要求。
另(ling)外，建議在臨(lin)(lin)床(chuang)試驗中選擇部(bu)分含干擾物質的(de)標本進行對(dui)比研(yan)究(jiu)，包(bao)括高(gao)脂、溶血、黃(huang)疸的(de)樣(yang)本，RF、ANA陽(yang)性(xing)(xing)樣(yang)本，易共存的(de)其它腫瘤標志(zhi)物抗原(yuan)同時(shi)升高(gao)的(de)患者標本，以從(cong)臨(lin)(lin)床(chuang)角(jiao)度驗證(zheng)試劑的(de)特異(yi)性(xing)(xing)。
5.統計學分析
對臨(lin)床(chuang)試(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan)(yan)結(jie)果(guo)(guo)的(de)(de)統計(ji)(ji)應(ying)選擇合(he)(he)適的(de)(de)統計(ji)(ji)方法，如相(xiang)關分(fen)析、線(xian)性(xing)回歸、受試(shi)(shi)(shi)者(zhe)工(gong)作特征（ROC）曲線(xian)分(fen)析、陰/陽性(xing)符合(he)(he)率(lv)(lv)等。對于對比實驗(yan)(yan)(yan)的(de)(de)等效(xiao)性(xing)研究，最常(chang)用是對考核試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)和參比試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)兩組檢測(ce)結(jie)果(guo)(guo)的(de)(de)相(xiang)關及線(xian)性(xing)回歸分(fen)析，應(ying)重點(dian)觀察相(xiang)關系(xi)數（r值）或判定系(xi)數（R2）、回歸擬合(he)(he)方程（斜(xie)率(lv)(lv)和y軸(zhou)截距(ju)）等指標(biao)。結(jie)合(he)(he)臨(lin)床(chuang)試(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan)(yan)數據(ju)的(de)(de)正(zheng)/偏態分(fen)布情(qing)況，建(jian)議(yi)統計(ji)(ji)學(xue)負(fu)責人選擇合(he)(he)理的(de)(de)統計(ji)(ji)學(xue)方法進行分(fen)析，統計(ji)(ji)分(fen)析應(ying)可以證明(ming)兩種方法的(de)(de)檢測(ce)結(jie)果(guo)(guo)無明(ming)顯統計(ji)(ji)學(xue)差異(yi)。在(zai)臨(lin)床(chuang)研究方案中應(ying)明(ming)確統計(ji)(ji)檢驗(yan)(yan)(yan)假(jia)設(she)，即評價考核試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)與參比試(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)是否等效(xiao)的(de)(de)標(biao)準(zhun)。
6.結果(guo)差異樣本(ben)的驗證(zheng)
在數據(ju)收集(ji)過程中(zhong)，對于兩種試劑的檢測結果(guo)有明顯差(cha)異(yi)的樣(yang)本，應采用臨床(chuang)上普遍認為質量較好的第三種同類試劑進行(xing)驗證(zheng)試驗，同時結合患者的臨床(chuang)病情對差(cha)異(yi)原因及可能結果(guo)進行(xing)分析。
7.臨床試驗總結報告(gao)撰寫(xie)
根據《體外(wai)診斷試劑臨床(chuang)(chuang)研究技術指導(dao)原則》的(de)(de)(de)要(yao)求，臨床(chuang)(chuang)試驗報告應該(gai)對(dui)(dui)試驗的(de)(de)(de)整(zheng)體設(she)計及各個(ge)關鍵點(dian)給予清晰、完整(zheng)的(de)(de)(de)闡述，應該(gai)對(dui)(dui)整(zheng)個(ge)臨床(chuang)(chuang)試驗實施過程(cheng)、結果分析、結論等進(jin)行條理分明的(de)(de)(de)描(miao)述，并應包(bao)括必要(yao)的(de)(de)(de)基礎數據和統計分析方(fang)法。建(jian)議在臨床(chuang)(chuang)總(zong)結報告中對(dui)(dui)以下內容進(jin)行詳述。
（1）臨(lin)床試驗(yan)總體設計及方案描(miao)述
① 臨床試(shi)驗的整體(ti)管(guan)理情況(kuang)、臨床研(yan)究(jiu)單位(wei)選(xuan)擇、臨床主要研(yan)究(jiu)人員簡(jian)介(jie)等(deng)基(ji)本情況(kuang)介(jie)紹；
② 病(bing)例納入/排除標準(zhun)、不同病(bing)種的(de)預期選(xuan)擇例數及健康人群的(de)選(xuan)擇標準(zhun)；
③ 樣本類型，樣本的收集(ji)、處理(li)及保(bao)存等；
④ 統計學方法、統計軟件、評價統計結果的標(biao)準；
（2） 具體(ti)的臨(lin)床(chuang)試驗情況
① 考核試(shi)劑和參比試(shi)劑的(de)名稱、批號、有效期及(ji)所用(yong)機型等信(xin)息(xi)；
② 對各研究單位的病例(li)數、病種分布情況進行總合，建議以列表或圖示(shi)方式給出具體例(li)數及百(bai)分比；
③ 質(zhi)量控(kong)(kong)制(zhi)，試驗人(ren)員培訓、儀(yi)器日常維護、儀(yi)器校準、質(zhi)控(kong)(kong)品運(yun)行情況，對(dui)檢測精密度、質(zhi)控(kong)(kong)品回(hui)收（或測量值）、抽查(cha)結果評估；
④ 具體試驗過程，樣(yang)本檢測(ce)、數據收集、樣(yang)本長期保存、結(jie)果不一致樣(yang)本的校(xiao)驗等(deng)。
（3） 統(tong)計學分析
① 數(shu)(shu)據(ju)預處(chu)理、差(cha)異(yi)數(shu)(shu)據(ju)的重新檢測或(huo)第三方驗證以及是否(fou)(fou)納入最終(zhong)數(shu)(shu)據(ju)統計、對(dui)異(yi)常值或(huo)缺(que)失值的處(chu)理、研究過(guo)程中是否(fou)(fou)涉及對(dui)方案的修改(gai)
② 定性結果(guo)的(de)一致(zhi)性分析(xi)
陽性(xing)符合率(lv)、陰性(xing)符合率(lv)、總體符合率(lv)及其95%（或99%）的(de)(de)(de)置信區(qu)間。以交叉表的(de)(de)(de)形式總結(jie)(jie)兩種試劑的(de)(de)(de)定(ding)性(xing)檢(jian)測結(jie)(jie)果，對定(ding)性(xing)結(jie)(jie)果進(jin)行四格(ge)表卡(ka)方或kappa檢(jian)驗以驗證兩種試劑定(ding)性(xing)結(jie)(jie)果的(de)(de)(de)一致性(xing)。
③ 定量值相關性(xing)和一致性(xing)分析
用回歸分析驗(yan)證兩種(zhong)試劑(ji)結(jie)(jie)(jie)(jie)果(guo)的相關性，以y=a+bx和R2的形式給出回歸分析的擬合方程，其中：y是(shi)(shi)考核試劑(ji)結(jie)(jie)(jie)(jie)果(guo)，x是(shi)(shi)參比(bi)試劑(ji)結(jie)(jie)(jie)(jie)果(guo)，b是(shi)(shi)方程斜率(lv)，a是(shi)(shi)y軸截距，R2是(shi)(shi)判定系數(shu)，同(tong)時應(ying)給出b的95%（或99%）置(zhi)信區間，定量值結(jie)(jie)(jie)(jie)果(guo)應(ying)無(wu)明顯統計學差異。
另外(wai)考慮到在(zai)不(bu)同的(de)(de)樣本濃度區(qu)間(jian)試劑(ji)(ji)的(de)(de)性能(neng)可能(neng)存在(zai)一定差異，因此(ci)，建議對總體濃度范(fan)圍進行(xing)區(qu)間(jian)分層統計(ji)，對不(bu)同濃度區(qu)間(jian)內的(de)(de)結果進行(xing)相關(guan)性分析以更好的(de)(de)驗(yan)證兩種試劑(ji)(ji)的(de)(de)相關(guan)性。
對新腫瘤標志(zhi)物(wu)(wu)系(xi)列(lie)監測研究，建議按(an)照患(huan)者治療后(hou)病情狀況進行逐級分組，并確定(ding)分組的臨床診斷標準，對各組數據分別(bie)進行統計學處(chu)理(li)，判斷被觀察腫瘤標志(zhi)物(wu)(wu)的濃(nong)度隨疾病狀況的變化情況。
（4） 討論和結論
對總體結果(guo)進行(xing)總結性描述并簡要分(fen)析試(shi)驗結果(guo)，對本次(ci)臨床(chuang)研究(jiu)有無(wu)特別說明，最后得出(chu)臨床(chuang)試(shi)驗結論。
四、名詞解釋
1.腫瘤標志物（Tumor Marker）：是(shi)指在惡性腫瘤發生(sheng)和增殖過程中,由腫瘤細(xi)胞產生(sheng)或機體反應而異常產生(sheng)和/或升高的，反映腫瘤細(xi)胞特性的一類物質。
2.準確(que)度(du)（accuracy）：一(yi)(yi)個測量值(zhi)與可接受的(de)參考值(zhi)間的(de)一(yi)(yi)致程度(du)。
3.最低檢測(ce)限/分析靈(ling)敏度（Lower detection limit）：樣品中以一定概率可被(bei)聲明(ming)與零(ling)(ling)有(you)差異的(de)被(bei)測(ce)量的(de)最低值。本指導(dao)原(yuan)則中的(de)最低檢測(ce)限為區別于零(ling)(ling)的(de)不低于95%可信區間的(de)最低濃度。
4.分析(xi)(xi)特異性（analytical Specificity）：測量(liang)程(cheng)序(xu)只測量(liang)被(bei)測量(liang)物(wu)(wu)(wu)(wu)的(de)能(neng)力。分析(xi)(xi)特異性用于(yu)描述檢測程(cheng)序(xu)在(zai)樣本中有其它物(wu)(wu)(wu)(wu)質存在(zai)時只測量(liang)被(bei)測量(liang)物(wu)(wu)(wu)(wu)的(de)能(neng)力。通常以一個(ge)被(bei)評估(gu)的(de)潛在(zai)干(gan)擾(rao)物(wu)(wu)(wu)(wu)清(qing)單來描述，并給出在(zai)特定醫學相關濃度值水平的(de)分析(xi)(xi)干(gan)擾(rao)程(cheng)度。
注：潛在干擾物包(bao)括干擾物和(he)交叉反應物。
5.線(xian)性(xing)(xing)（linearity）：在給定測(ce)(ce)(ce)量(liang)范圍(wei)內，給出的(de)測(ce)(ce)(ce)量(liang)結果與(yu)樣(yang)(yang)品中實際存在的(de)被測(ce)(ce)(ce)量(liang)物的(de)值成(cheng)比(bi)例的(de)能力(li)。線(xian)性(xing)(xing)是描述一個(ge)測(ce)(ce)(ce)量(liang)系統的(de)測(ce)(ce)(ce)量(liang)示(shi)值或測(ce)(ce)(ce)量(liang)結果相關于樣(yang)(yang)本的(de)賦值符(fu)合(he)直線(xian)的(de)屬性(xing)(xing)。
6.精密度（precision）：在規定條件下，相互獨立的(de)(de)測試(shi)結果之間(jian)的(de)(de)一致程(cheng)度。精密度的(de)(de)程(cheng)度是(shi)用(yong)統計學方法得到的(de)(de)測量不精密度的(de)(de)數字形(xing)式表示，如標準差(cha)（SD）和(he)變(bian)異系數（CV）。
五、參考文獻：
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3.《體外診斷試劑(ji)說(shuo)明(ming)書(shu)編寫指導原則》，（國食藥監械(xie)[2007]240號），2007.4.28
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6.馮仁豐，《臨(lin)床檢驗質量管理技(ji)(ji)術(shu)基(ji)礎(chu)》（第二版(ban)），上(shang)海(hai)科學技(ji)(ji)術(shu)文獻(xian)出(chu)版(ban)社，2007年4月。
7.《中國生物制品規(gui)程》（2000年(nian)版），化學工業出(chu)版社
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