人(ren)類免疫缺陷(xian)病毒（HIV）檢測試(shi)劑臨床研究
注冊申報指導原則（征求意見稿2）
一、前言
人(ren)類(lei)免疫缺陷病毒(du)（Human Immunodeficiency Virus，HIV）檢測試劑(ji)(ji)是(shi)指(zhi)利用免疫學及分子生(sheng)物學等方(fang)法(fa)(fa)原(yuan)理對人(ren)血清、血漿或其(qi)它(ta)體(ti)(ti)液中的特定(ding)的HIV生(sheng)物學標記物，包括HIV-1 p24抗原(yuan)、HIV抗體(ti)(ti)（anti-HIV）、HIV核酸、HIV基(ji)因耐藥突變等進行定(ding)量或定(ding)性分析的試劑(ji)(ji)。據《體(ti)(ti)外診(zhen)斷試劑(ji)(ji)注冊管(guan)理辦(ban)法(fa)(fa)（試行）》（以下簡稱《辦(ban)法(fa)(fa)》）的分類(lei)原(yuan)則(ze)，該類(lei)產(chan)品作(zuo)為第三(san)類(lei)體(ti)(ti)外診(zhen)斷（in vitro diagnostic；IVD）試劑(ji)(ji)管(guan)理，屬高風險(xian)管(guan)理產(chan)品。本指(zhi)導原(yuan)則(ze)制(zhi)定(ding)的主要(yao)目的是(shi)讓申請人(ren)明確在(zai)注冊申報過(guo)程中對本類(lei)試劑(ji)(ji)在(zai)臨床研(yan)究方(fang)面(mian)重點(dian)關注內(nei)容(rong)，同時規(gui)范注冊申請人(ren)對于注冊申報資料(liao)中有關臨床研(yan)究資料(liao)的要(yao)求(qiu)。
本指導(dao)原則是對HIV檢測試劑有關臨床研究的(de)一般(ban)性(xing)(xing)要(yao)求，申請人應(ying)(ying)依(yi)(yi)據具體(ti)產(chan)品的(de)特性(xing)(xing)對臨床研究資料的(de)內容進行(xing)充(chong)實和(he)細化。申請人還應(ying)(ying)依(yi)(yi)據具體(ti)產(chan)品的(de)特性(xing)(xing)確定其中的(de)具體(ti)內容是否(fou)適用(yong)，若(ruo)不適用(yong)，需具體(ti)闡述(shu)其理(li)由及相應(ying)(ying)的(de)科(ke)學依(yi)(yi)據。
本指(zhi)導原則只是針(zhen)對(dui)HIV檢(jian)測試(shi)(shi)劑的(de)(de)特點(dian)，強調需重點(dian)考慮的(de)(de)問題，臨(lin)床(chuang)試(shi)(shi)驗的(de)(de)基本要求(qiu)應符(fu)合《體(ti)外(wai)診(zhen)斷(duan)試(shi)(shi)劑臨(lin)床(chuang)試(shi)(shi)驗指(zhi)導原則》的(de)(de)規定，包括臨(lin)床(chuang)試(shi)(shi)驗協議、方案、報告(gao)的(de)(de)撰寫等。
本(ben)指(zhi)(zhi)導原則不包括行政審批要(yao)求，不作(zuo)為法(fa)規強制執行。本(ben)指(zhi)(zhi)導原則是申請人和(he)審查人員的(de)(de)指(zhi)(zhi)導文件，如果有能(neng)夠滿足適合(he)的(de)(de)法(fa)規要(yao)求的(de)(de)其它方法(fa)，也可(ke)以采用(yong)，但是需要(yao)提(ti)(ti)供詳細的(de)(de)研究資料和(he)驗(yan)證資料。應在遵循相關法(fa)規的(de)(de)前提(ti)(ti)下使用(yong)本(ben)指(zhi)(zhi)導原則。
本指導原則是在現行法規和標準體系以及當前認知水平下制定，隨著法規和標準的不斷完善，以及科學技術的不斷發展，本指導原則相關內容也將進行適時的調整。
二、適用范圍
HIV生物學標記物是(shi)指機體在感染(ran)HIV后，在不同的(de)(de)感染(ran)階段出現的(de)(de)生物學標記物，包括：HIV抗體、HIV-1 p24抗原(yuan)、HIV核(he)酸、HIV基因(yin)耐(nai)藥突變等。
就方法(fa)(fa)學而(er)言，本指(zhi)南主要適(shi)用(yong)于利用(yong)免疫(yi)印跡(ji)法(fa)(fa)、化學發光(guang)(guang)法(fa)(fa)、時(shi)間(jian)分(fen)辨免疫(yi)熒光(guang)(guang)法(fa)(fa)和(he)微粒(li)子酶聯免疫(yi)法(fa)(fa)、膠(jiao)體(ti)金(jin)法(fa)(fa)等(deng)(deng)免疫(yi)學方法(fa)(fa)對HIV抗原和(he)/或抗體(ti)進行定(ding)量或定(ding)性(xing)檢測(ce)的(de)體(ti)外診(zhen)斷試(shi)劑，以及(ji)應用(yong)核酸檢測(ce)的(de)方法(fa)(fa)（如RT-PCR、TMA、NASBA、bDNA、實時(shi)熒光(guang)(guang)PCR等(deng)(deng)）對HIV 核酸（RNA/DNA）以及(ji)基因耐藥突變(bian)等(deng)(deng)進行檢測(ce)和(he)分(fen)析的(de)體(ti)外診(zhen)斷試(shi)劑，適(shi)用(yong)于首次注冊產品(pin)及(ji)申請許可事項變(bian)更的(de)產品(pin)。
本指導原則不適用于國家法定血源篩查用HIV檢測試劑。
三、基本要求
（一(yi)）臨床試驗方(fang)案(an)及方(fang)案(an)中應(ying)關注的問題
臨(lin)床(chuang)(chuang)試(shi)(shi)(shi)驗(yan)實(shi)施前(qian)，研究(jiu)(jiu)(jiu)人(ren)(ren)員(yuan)應(ying)從(cong)流(liu)行(xing)病(bing)學(xue)、統計(ji)學(xue)、臨(lin)床(chuang)(chuang)醫學(xue)、檢驗(yan)醫學(xue)等多方面考(kao)慮(lv)，設(she)計(ji)科學(xue)合(he)理(li)的臨(lin)床(chuang)(chuang)研究(jiu)(jiu)(jiu)方案(an)(an)。各臨(lin)床(chuang)(chuang)研究(jiu)(jiu)(jiu)機構(gou)(gou)的方案(an)(an)設(she)置應(ying)基本一致，且保證在整個臨(lin)床(chuang)(chuang)試(shi)(shi)(shi)驗(yan)過(guo)程中遵循預定的方案(an)(an)實(shi)施，不(bu)可隨(sui)意改動。整個試(shi)(shi)(shi)驗(yan)過(guo)程應(ying)在臨(lin)床(chuang)(chuang)研究(jiu)(jiu)(jiu)機構(gou)(gou)的實(shi)驗(yan)室內并由本實(shi)驗(yan)室的技術人(ren)(ren)員(yuan)操作完(wan)成，申(shen)報(bao)單(dan)位的技術人(ren)(ren)員(yuan)除進(jin)行(xing)必要的技術指導外，不(bu)得隨(sui)意干涉實(shi)驗(yan)進(jin)程，尤(you)其是數據收(shou)集過(guo)程。各臨(lin)床(chuang)(chuang)研究(jiu)(jiu)(jiu)單(dan)位選用的參比試(shi)(shi)(shi)劑（包括(kuo)與試(shi)(shi)(shi)劑配套(tao)的相應(ying)儀器）應(ying)完(wan)全一致，以便進(jin)行(xing)合(he)理(li)的統計(ji)學(xue)分析。
試驗(yan)(yan)方案中應(ying)(ying)確定(ding)嚴格的(de)病例(li)納入/排(pai)(pai)除標(biao)準，任何(he)已經入選的(de)病例(li)再被排(pai)(pai)除出臨床研究都應(ying)(ying)記錄在案并明(ming)確說明(ming)原因(yin)。臨床試驗(yan)(yan)中所涉及(ji)的(de)樣(yang)本類型應(ying)(ying)與(yu)產品說明(ming)書一(yi)致(zhi)，且(qie)每種樣(yang)本類型例(li)數的(de)選擇應(ying)(ying)符(fu)合基本的(de)統計學(xue)要求。
1. 臨床研究單位的(de)選擇(ze)
建(jian)議(yi)在選(xuan)擇臨床(chuang)單位時，綜合不同地(di)區(qu)人種、流行(xing)病學背(bei)景、HIV的(de)特性等因素選(xuan)擇研究單位；臨床(chuang)研究單位的(de)實(shi)驗操作(zuo)人員應(ying)熟悉(xi)檢測系統的(de)各(ge)環節（儀器、試劑(ji)、質控及操作(zuo)程序等），熟悉(xi)臨床(chuang)研究方案。
在整個(ge)實驗(yan)中，擬申報產品（以下(xia)稱考核(he)試(shi)(shi)劑(ji)）、對比試(shi)(shi)劑(ji)、確(que)認試(shi)(shi)驗(yan)方法都應處于有(you)效的質量控制下(xia)，同時(shi)按(an)照試(shi)(shi)劑(ji)說明書(shu)的要求，定期對試(shi)(shi)驗(yan)所涉(she)及(ji)的儀器進行校準，以最大(da)限度保證(zheng)試(shi)(shi)驗(yan)數據的準確(que)性及(ji)可重(zhong)復(fu)性。
建議在不同的(de)臨床(chuang)單位使用(yong)同一批考核(he)試劑進行臨床(chuang)試驗，以便對數據進行科學(xue)客觀的(de)統計分析。
2. 新(xin)HIV檢(jian)測試劑(ji)的臨床研(yan)究
新(xin)HIV檢測試劑(ji)(ji)主要(yao)包括兩類：定量檢測試劑(ji)(ji)和(he)定性(xing)檢測試劑(ji)(ji)。
對于這些無對比試(shi)(shi)劑(ji)(ji)可(ke)選(xuan)擇(ze)的(de)新HIV檢測試(shi)(shi)劑(ji)(ji)而言(yan)，其臨(lin)床研(yan)究(jiu)應選(xuan)擇(ze)經金(jin)標準方法確診的(de)HIV感(gan)染人(ren)(ren)群和(he)部分未感(gan)染HIV的(de)正(zheng)常人(ren)(ren)群，及(ji)與已有的(de)相關標記物及(ji)臨(lin)床進展及(ji)轉歸(gui)進行比較研(yan)究(jiu)，驗證(zheng)考(kao)核試(shi)(shi)劑(ji)(ji)的(de)敏(min)感(gan)性和(he)特異性。
對于定(ding)量檢(jian)測試(shi)劑同(tong)時(shi)還應對其量值(zhi)與(yu)臨床進(jin)展狀況、轉歸、治療情(qing)況等的相關(guan)性進(jin)行分析。
3. 已(yi)有同類產品上(shang)市的(de)臨床研究
選擇境內已(yi)(yi)批準(zhun)上(shang)(shang)市(shi)、臨(lin)床(chuang)普遍認為(wei)質量(liang)較好的(de)同類產(chan)(chan)品(pin)作為(wei)對(dui)比(bi)試(shi)(shi)(shi)劑，使考核試(shi)(shi)(shi)劑與之進行對(dui)比(bi)試(shi)(shi)(shi)驗研究(jiu)，證明(ming)本品(pin)與已(yi)(yi)上(shang)(shang)市(shi)產(chan)(chan)品(pin)等效或優于已(yi)(yi)上(shang)(shang)市(shi)產(chan)(chan)品(pin)。在臨(lin)床(chuang)研究(jiu)中(zhong)，與已(yi)(yi)有同類產(chan)(chan)品(pin)進行比(bi)對(dui)時(shi)，往往會出現不(bu)一(yi)致(zhi)的(de)檢(jian)測結(jie)果。對(dui)于這些檢(jian)測結(jie)果不(bu)一(yi)致(zhi)的(de)樣(yang)品(pin)，應采用金標(biao)準(zhun)或其它(ta)方法再次進行確認或提供臨(lin)床(chuang)診斷(duan)資料以進一(yi)步明(ming)確樣(yang)品(pin)（采集樣(yang)品(pin)時(shi)受試(shi)(shi)(shi)者）所處的(de)感染狀態(tai)，從而對(dui)考核試(shi)(shi)(shi)劑的(de)性能(neng)進行客觀(guan)科學(xue)的(de)評價。
確認試驗應選用境內已批準上市且臨床普(pu)遍認為(wei)質量較好的確認試劑(ji)。
對于定(ding)(ding)量檢測試劑(ji)，同時(shi)還應(ying)該分析(xi)檢測量值的(de)線(xian)性相關性、定(ding)(ding)量檢測結(jie)果與對比試劑(ji)檢測結(jie)果的(de)一(yi)致性等。
4. 臨(lin)床研究對象選擇(ze)
（1） 總體要求(qiu)
根據《體外(wai)診(zhen)斷試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)臨(lin)床(chuang)試(shi)(shi)(shi)(shi)驗指導原則》的要(yao)求，HIV檢(jian)(jian)測試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)，一般包括抗原和(he)/或抗體（檢(jian)(jian)測）類(lei)(lei)(lei)試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)、核酸擴(kuo)增(zeng)（檢(jian)(jian)測）類(lei)(lei)(lei)試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)，二者對(dui)(dui)于(yu)臨(lin)床(chuang)研究(jiu)的病例數并不相同。對(dui)(dui)于(yu)臨(lin)床(chuang)試(shi)(shi)(shi)(shi)驗而言，抗原和(he)/或抗體（檢(jian)(jian)測）類(lei)(lei)(lei)試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)需要(yao)至(zhi)少1000例，核酸擴(kuo)增(zeng)（檢(jian)(jian)測）類(lei)(lei)(lei)試(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)至(zhi)少500例。
（2） 基因型(xing)方面的(de)考慮(lv)
HIV病毒為(wei)(wei)逆(ni)轉錄病毒，其(qi)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)具有(you)顯著的(de)(de)(de)(de)(de)多樣性，不(bu)同(tong)(tong)(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)地(di)(di)(di)區(qu)和民族，HIV流(liu)(liu)行(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)型(xing)(xing)(xing)(xing)不(bu)同(tong)(tong)(tong)。境(jing)內(nei)流(liu)(liu)行(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)HIV主(zhu)要(yao)為(wei)(wei)M組(zu)(zu)(zu)HIV-1型(xing)(xing)(xing)(xing)（目前境(jing)內(nei)尚未見(jian)HIV-1 N組(zu)(zu)(zu)和O組(zu)(zu)(zu)的(de)(de)(de)(de)(de)報道(dao)(dao)，HIV-2型(xing)(xing)(xing)(xing)感染病例的(de)(de)(de)(de)(de)報道(dao)(dao)極(ji)少(shao)），其(qi)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)型(xing)(xing)(xing)(xing)主(zhu)要(yao)為(wei)(wei)B/B’、BC重(zhong)組(zu)(zu)(zu)型(xing)(xing)(xing)(xing)（包(bao)括(kuo)(kuo)CRF 07_BC重(zhong)組(zu)(zu)(zu)型(xing)(xing)(xing)(xing)和CRF 08_BC重(zhong)組(zu)(zu)(zu)型(xing)(xing)(xing)(xing)）以(yi)及AE重(zhong)組(zu)(zu)(zu)型(xing)(xing)(xing)(xing)（CRF 01_AE重(zhong)組(zu)(zu)(zu)型(xing)(xing)(xing)(xing)）。而且，HIV-1基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)型(xing)(xing)(xing)(xing)具有(you)一定的(de)(de)(de)(de)(de)地(di)(di)(di)域差異，不(bu)同(tong)(tong)(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)地(di)(di)(di)區(qu)流(liu)(liu)行(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)HIV基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)型(xing)(xing)(xing)(xing)也不(bu)盡相同(tong)(tong)(tong)，如CRF 07_BC重(zhong)組(zu)(zu)(zu)型(xing)(xing)(xing)(xing)流(liu)(liu)行(xing)于四川、新疆等地(di)(di)(di)，而CRF 08_BC重(zhong)組(zu)(zu)(zu)型(xing)(xing)(xing)(xing)則流(liu)(liu)行(xing)于廣西等地(di)(di)(di)，因(yin)(yin)(yin)此(ci)，在選(xuan)擇HIV感染者(zhe)病例時，首先應根據HIV流(liu)(liu)行(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)情(qing)況，選(xuan)擇能(neng)代(dai)表我(wo)國流(liu)(liu)行(xing)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)型(xing)(xing)(xing)(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)、不(bu)同(tong)(tong)(tong)地(di)(di)(di)區(qu)的(de)(de)(de)(de)(de)HIV-1感染者(zhe)病例，以(yi)對(dui)試劑檢測我(wo)國流(liu)(liu)行(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)HIV-1感染的(de)(de)(de)(de)(de)能(neng)力進行(xing)客觀科學的(de)(de)(de)(de)(de)評(ping)價，選(xuan)擇的(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)型(xing)(xing)(xing)(xing)應至少(shao)包(bao)括(kuo)(kuo)三種(zhong)不(bu)同(tong)(tong)(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)型(xing)(xing)(xing)(xing)。
a.對于HIV-1感染者的(de)病(bing)例數(shu)，HIV-1感染者病(bing)例數(shu)應具有統計(ji)學意義。
表1. 不(bu)同HIV檢測試劑對于臨床樣本(ben)選(xuan)擇的一些(xie)基本(ben)考慮
方法 | 例數 | 陽性樣本 | 干擾 |
第三代發光類試劑 （預期用途為臨床而非(fei)血源(yuan)篩查） | 至少1000 | HIV-1 400例 對于我國流行的主要基因型（至少3種）每(mei)種不少于10例。 經過全面驗證的陽轉血清至少5套 | RF+, 相關(guan)病毒(du)，孕婦(fu)等(deng) |
第四代發光類試劑 （預期用途為(wei)臨床而非(fei)血源篩查(cha)） | 至少1000 | HIV-1 400例 對(dui)于(yu)我國流行的主要(yao)基因型（至少3種(zhong)）每種(zhong)不少于(yu)10例。 經(jing)過全面(mian)驗證的陽轉血清(qing)盤至(zhi)少10套 （部分(fen)病例抗(kang)原(yuan)和抗(kang)體(ti)應(ying)分(fen)別進行驗證(zheng)） | RF+, 相關病毒，孕婦(fu)等 |
NAT（定量） | 至少500 | HIV-1 450例 對于我國流行的主要(yao)基因(yin)型（至(zhi)少3種）每種不少于30例(li)，應具有統計學意義。 | 抗病毒治療(liao)藥物、相關病毒 |
NAT（定性） | 至少500 | HIV-1 300例 對(dui)于我(wo)國(guo)流行(xing)的主要基因型（至少3種(zhong)）每種(zhong)不少于30例，應具有統(tong)計學(xue)意義。 | 抗病毒治(zhi)療(liao)藥物、相關病毒 |
WB | 至少1000 | HIV抗體初(chu)篩陽性900例，其(qi)中確診病例不少于80%。 對(dui)于(yu)我國(guo)流行的主要基因型（至(zhi)少3種）每種不少于(yu)10例(li)。 | RF+, 相(xiang)關病毒 |
膠體金類 | 至少1000 | HIV-1 300例 對于我國流行的主要基因(yin)型（至少(shao)3種）每種不少(shao)于10例。 | RF+, 相關病(bing)毒，孕婦等 |
基因耐藥突變 | 至少500 | HIV-1 450例 對于(yu)(yu)我國流行(xing)的(de)主要基(ji)因型（至少(shao)3種(zhong)(zhong)）每種(zhong)(zhong)不少(shao)于(yu)(yu)30例，應具有(you)統計(ji)學(xue)意義。 蛋白酶基因區存(cun)在耐藥突(tu)變至少200例。 逆轉錄酶基因區存在耐(nai)藥(yao)突變至少200例。 其它突變100例。 | 抗病毒治療藥物、相關病毒 |
注：陽轉血清盤檢測結(jie)果的(de)評價，應(ying)根據(ju)國內、國際的(de)相關規(gui)定進行(xing)評價。
b.對于HIV-1 O組、HIV-2型(xing)感染病例，也(ye)應進(jin)行(xing)適當(dang)驗證，樣本(ben)應經(jing)過(guo)科學的(de)驗證和確認，樣本(ben)可來源于HIV感染者，也(ye)可采用經(jing)過(guo)全面驗證的(de)血清盤。
（3） 不同感染(ran)階(jie)段(duan)的考慮
HIV感染機體(ti)后，在不同(tong)(tong)的(de)時(shi)期(qi)機體(ti)的(de)免疫反應(ying)(ying)不同(tong)(tong)，其代(dai)表的(de)生物(wu)學標記物(wu)也不同(tong)(tong)，標記物(wu)的(de)濃(nong)度(du)也不同(tong)(tong)，樣本選擇時(shi)，對于(yu)樣本滴度(du)應(ying)(ying)含有一定(ding)數(shu)量的(de)低滴度(du)/弱(ruo)陽(yang)性樣本。
（4） 臨床(chuang)樣品量的(de)考慮
臨床(chuang)研究應(ying)選擇(ze)部分正(zheng)常健(jian)康(kang)人(ren)群樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)和(he)干擾(rao)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)（交叉反應(ying)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)），比較正(zheng)常組(zu)、干擾(rao)組(zu)和(he)感染組(zu)結果，以便對(dui)申報產品的(de)臨床(chuang)性能做出全面科學的(de)分析。建議(yi)對(dui)抗(kang)原和(he)抗(kang)體(ti)類試劑，其(qi)(qi)(qi)(qi)健(jian)康(kang)人(ren)群例(li)(li)數(shu)(shu)(shu)的(de)選擇(ze)以不超過(guo)500例(li)(li)為宜(yi)，陽(yang)性樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)數(shu)(shu)(shu)應(ying)符(fu)(fu)合(he)(he)表1要(yao)求(qiu)，其(qi)(qi)(qi)(qi)余為干擾(rao)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)。對(dui)核(he)酸(suan)檢測類試劑（定性），其(qi)(qi)(qi)(qi)健(jian)康(kang)人(ren)群例(li)(li)數(shu)(shu)(shu)的(de)選擇(ze)以不超過(guo)150例(li)(li)為宜(yi)，陽(yang)性樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)數(shu)(shu)(shu)應(ying)符(fu)(fu)合(he)(he)表1要(yao)求(qiu)，其(qi)(qi)(qi)(qi)余為干擾(rao)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)。對(dui)核(he)酸(suan)檢測類試劑（定量），其(qi)(qi)(qi)(qi)健(jian)康(kang)人(ren)群例(li)(li)數(shu)(shu)(shu)的(de)選擇(ze)以不超過(guo)30例(li)(li)為宜(yi)，陽(yang)性樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)數(shu)(shu)(shu)應(ying)符(fu)(fu)合(he)(he)表1要(yao)求(qiu)，其(qi)(qi)(qi)(qi)余為干擾(rao)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)。對(dui)于新型試劑或臨床(chuang)意義有待(dai)進一步明確的(de)試劑，可適當增加正(zheng)常樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)數(shu)(shu)(shu)。總體(ti)而言，本(ben)(ben)類試劑臨床(chuang)試驗(yan)的(de)樣(yang)(yang)(yang)本(ben)(ben)例(li)(li)數(shu)(shu)(shu)，無論是正(zheng)常組(zu)、干擾(rao)組(zu)和(he)HIV感染組(zu)，每一組(zu)受(shou)試者(zhe)的(de)最小入選人(ren)數(shu)(shu)(shu)須滿足(zu)統計學分析的(de)基本(ben)(ben)要(yao)求(qiu)。
檢測的樣本量(liang)在(zai)每一(yi)個臨床研究單位應盡可能均勻分布，包括正常組(zu)、干擾組(zu)和HIV感(gan)染組(zu)。
（5） 干擾（交叉(cha)反(fan)應）樣本的考慮
考(kao)慮到我國HIV感染的(de)特殊(shu)情況(kuang)以及HIV的(de)傳播特點，建(jian)議在臨(lin)(lin)床(chuang)研究中(zhong)選(xuan)擇臨(lin)(lin)床(chuang)病例(li)(li)時，應選(xuan)擇部分HIV相關病毒(du)（如HBV、HCV）感染的(de)病例(li)(li)，以評價考(kao)核試劑(ji)的(de)特異性。
干擾（交叉反應）樣本列(lie)表：
I/II型人類(lei)嗜T細胞病毒（HTLV-I/II） | 巨細(xi)胞病毒(du)（CMV） |
甲型流感病毒 | EB病毒（EBV） |
甲(jia)型肝(gan)炎病毒（HAV） | 系統性(xing)紅斑狼瘡（SLE） |
乙型肝(gan)炎病毒（HBV） | 類風濕因子（RF） |
丙型肝(gan)炎病毒（HCV） | 抗核抗體（ANA） |
以上特(te)異性樣(yang)本可根(gen)據產品特(te)性進(jin)行(xing)適當選(xuan)擇。
5. 體液樣本的考慮(lv)
對于(yu)唾液、尿液等體液樣(yang)本(ben)，無論(lun)考核試劑采用(yong)何(he)種檢驗方法，均應采用(yong)來自同(tong)(tong)一患者的血液樣(yang)本(ben)進(jin)行同(tong)(tong)源對比試驗，應含有一定數量(liang)的低滴度(du)/弱陽性(xing)樣(yang)本(ben)（不少于(yu)20例）。
檢(jian)測(ce)血(xue)(xue)液樣本(ben)(ben)用對比(bi)試(shi)劑的檢(jian)測(ce)性能應盡量高于(yu)考(kao)核試(shi)劑，對于(yu)檢(jian)測(ce)不(bu)符的樣本(ben)(ben)應采(cai)用金標準方法(fa)對血(xue)(xue)液樣本(ben)(ben)進行確(que)認。
6.凍存(cun)與新鮮樣本的考慮
陽(yang)性凍存樣(yang)本(ben)例(li)數(shu)應(ying)小于(yu)(yu)陽(yang)性樣(yang)本(ben)總例(li)數(shu)的(de)90％，陽(yang)性新鮮(xian)樣(yang)本(ben)例(li)數(shu)應(ying)大于(yu)(yu)陽(yang)性樣(yang)本(ben)總例(li)數(shu)的(de)10％。
7.確認試劑的考慮
抗體檢測：
a.樣本的選(xuan)擇(ze)：見表1初篩呈弱陽性。
b.對(dui)比試劑的選擇：應選擇確認(ren)試劑進行比對(dui)試驗(yan)。
c.不(bu)一致(zhi)和不(bu)確(que)定樣本的確(que)認：應進(jin)行患者隨訪檢測（4周后）或采用(yong)其他方法(fa)進(jin)行驗(yan)證。
8. 統計學(xue)分析
對臨床試驗結果的統計(ji)應(ying)選擇合適的統計(ji)方(fang)法。
對(dui)定(ding)性試(shi)劑(ji)(ji)，應(ying)分析考核(he)試(shi)劑(ji)(ji)的(de)陽性符合率、陰性符合率、總體符合率及其95%（或99%）的(de)置信區間、考核(he)試(shi)劑(ji)(ji)和(he)對(dui)比試(shi)劑(ji)(ji)的(de)一致性（如kappa值）。如利(li)用陽轉血(xue)清盤對(dui)試(shi)劑(ji)(ji)檢(jian)測早(zao)期感(gan)染的(de)能力進行評價，應(ying)參考WHO對(dui)HIV抗體試(shi)劑(ji)(ji)的(de)評價報告(gao)，分析考核(he)試(shi)劑(ji)(ji)的(de)陽轉血(xue)清相對(dui)敏感(gan)性系數。
對(dui)定量(liang)試(shi)(shi)劑，應(ying)分析(xi)考(kao)(kao)核(he)試(shi)(shi)劑陽(yang)性(xing)符合率、陰(yin)性(xing)符合率、總體符合率及(ji)(ji)其95%（或99%）的置(zhi)信區間、考(kao)(kao)核(he)試(shi)(shi)劑和對(dui)比(bi)試(shi)(shi)劑的一致(zhi)性(xing)（如(ru)kappa值）等之(zhi)外，還應(ying)該分析(xi)考(kao)(kao)核(he)試(shi)(shi)劑與(yu)對(dui)比(bi)試(shi)(shi)劑的相關(guan)性(xing)、線(xian)性(xing)回歸(gui)、定量(liang)準(zhun)確性(xing)及(ji)(ji)一致(zhi)性(xing)（如(ru)Bland-Altman 模型(xing)），同時按基(ji)因型(xing)（核(he)酸檢測試(shi)(shi)劑）對(dui)樣(yang)本進行(xing)分組分析(xi)考(kao)(kao)核(he)試(shi)(shi)劑與(yu)對(dui)比(bi)試(shi)(shi)劑的相關(guan)性(xing)、線(xian)性(xing)回歸(gui)、定量(liang)準(zhun)確性(xing)及(ji)(ji)一致(zhi)性(xing)（如(ru)Bland-Altman 模型(xing)）等。
對于對比實驗的等(deng)效性研(yan)究(jiu)，最(zui)常用是(shi)對考核試劑和對比試劑兩組檢測(ce)結(jie)果的相關(guan)(guan)及(ji)線性回(hui)歸(gui)分析，應重點觀(guan)察相關(guan)(guan)系數（r值）、回(hui)歸(gui)方(fang)程斜率及(ji)y軸(zhou)截距(ju)等(deng)指標。
對(dui)于統計(ji)方(fang)(fang)法的選擇可以選擇多種方(fang)(fang)法，而不用過(guo)于強調一(yi)種方(fang)(fang)法。在臨床研究方(fang)(fang)案中應明確統計(ji)檢驗假(jia)設，即評價考核試(shi)劑與對(dui)比試(shi)劑是否(fou)等效的標(biao)準。
9. 結果(guo)差異樣(yang)本的驗證
在數據收集過程中，對于兩種試劑的檢測結果有明顯差異的樣本，應采用金標準或其它方法再次進行確認（如HIV-1 p24抗原、HIV-1 RNA檢測試劑、Western Blot試劑等），對患者所處的HIV-1感染狀態進行鑒別，同時結合患者的臨床表征對差異原因及可能結果進行分析，必要時應按照《全國艾滋病檢測技術規范》的要求進行隨訪。
（二）臨床試驗（總結(jie)）報(bao)告撰寫
根(gen)據《體(ti)外診斷(duan)試(shi)劑臨床(chuang)研究技術指(zhi)導原則》的要求，臨床(chuang)試(shi)驗(yan)(yan)報(bao)(bao)告應該對(dui)試(shi)驗(yan)(yan)的整(zheng)體(ti)設計及各個(ge)關鍵點給予清(qing)晰、完整(zheng)的闡述(shu)(shu)，應該對(dui)整(zheng)個(ge)臨床(chuang)試(shi)驗(yan)(yan)實施(shi)過程(cheng)、結果分析、結論等進(jin)行條理分明的描(miao)述(shu)(shu)，并(bing)應包括必要的基(ji)礎數(shu)據和統計分析方法。建議在臨床(chuang)試(shi)驗(yan)(yan)總(zong)結報(bao)(bao)告中對(dui)以下內容進(jin)行詳(xiang)述(shu)(shu)。
1.臨床試驗總體設計及方案描述
（1）臨床試(shi)驗的整體管理情(qing)況、臨床研究單位的選(xuan)擇、對(dui)比試(shi)劑及所用(yong)儀器基本情(qing)況介紹
（2）病例納入(ru)/排除標(biao)準、不同病種(zhong)的預期選擇例數
（3）樣本類型，樣本的收(shou)集、處理及保存(cun)等
（4）統(tong)(tong)(tong)計(ji)學(xue)方法、統(tong)(tong)(tong)計(ji)軟件、評價統(tong)(tong)(tong)計(ji)結果的標準(zhun)
2.具體的臨床試驗情況
（1）對各(ge)研究(jiu)單位的病(bing)例數(shu)、病(bing)種分布(bu)情(qing)況進行總合，以列表或圖示方(fang)式給出具體(ti)例數(shu)及百分比。
（2）質量控(kong)制：如(ru)試驗人員培訓、儀(yi)器(qi)日(ri)常維護(hu)、儀(yi)器(qi)校準(zhun)、質控(kong)品運(yun)行情況(kuang)等。
（3）具體試驗(yan)過程，樣(yang)本(ben)(ben)檢測、數據收集、樣(yang)本(ben)(ben)長期保存、結果不一(yi)致樣(yang)本(ben)(ben)的(de)驗(yan)證鑒別等(deng)
3.統計學分析
（1）數(shu)據(ju)預處理、差異(yi)數(shu)據(ju)的(de)重新檢測或驗證鑒別以及(ji)是否納入最(zui)終(zhong)數(shu)據(ju)統(tong)計(ji)、對(dui)異(yi)常值或缺(que)失值的(de)處理、研究(jiu)過(guo)程中是否涉及(ji)對(dui)方(fang)案的(de)修改等。
（2）一致性(xing)分析和相關性(xing)
相關性(xing)主(zhu)要包括(kuo)陽性(xing)符合率、陰性(xing)符合率、總體符合率及其95%（或99%）的置信區間(jian)。一(yi)般可采用四格表卡方檢驗(yan)或kappa檢驗(yan)分析兩種試劑定(ding)性(xing)檢測結果(guo)的一(yi)致性(xing)。
對于定(ding)(ding)量試劑(ji)(ji)，還(huan)應運行(xing)(xing)特定(ding)(ding)的(de)(de)(de)數據(ju)分(fen)(fen)析(xi)模(mo)型（如Bland-Altman 模(mo)型）對兩(liang)種(zhong)試劑(ji)(ji)定(ding)(ding)量分(fen)(fen)析(xi)結果(guo)的(de)(de)(de)一致(zhi)性(xing)進行(xing)(xing)分(fen)(fen)析(xi)。同(tong)(tong)時(shi)，還(huan)應采用回歸分(fen)(fen)析(xi)的(de)(de)(de)方法分(fen)(fen)析(xi)兩(liang)種(zhong)試劑(ji)(ji)檢(jian)測結果(guo)的(de)(de)(de)相關性(xing)，以(yi)y=a+bx和(he)R2的(de)(de)(de)形式給(gei)出(chu)回歸分(fen)(fen)析(xi)的(de)(de)(de)擬合(he)方程，其(qi)中(zhong)：y是(shi)實(shi)驗試劑(ji)(ji)結果(guo)，x是(shi)參比試劑(ji)(ji)結果(guo)，b是(shi)方程斜率，a是(shi)y軸(zhou)截距，R2是(shi)判定(ding)(ding)系數，并(bing)給(gei)出(chu)a和(he)b的(de)(de)(de)95%（或99%）置信區(qu)(qu)間。由于不同(tong)(tong)HIV-1基因型或者不同(tong)(tong)濃度區(qu)(qu)間，試劑(ji)(ji)的(de)(de)(de)性(xing)能(neng)可能(neng)存在(zai)一定(ding)(ding)差(cha)異，因此，建議對總(zong)體樣品(pin)，按照濃度范圍和(he)/或基因型進行(xing)(xing)區(qu)(qu)間分(fen)(fen)層統(tong)計，對不同(tong)(tong)區(qu)(qu)間內的(de)(de)(de)結果(guo)進行(xing)(xing)相關性(xing)和(he)一致(zhi)性(xing)分(fen)(fen)析(xi)，以(yi)更(geng)好的(de)(de)(de)驗證兩(liang)種(zhong)試劑(ji)(ji)的(de)(de)(de)相關性(xing)。
4.討論和結論
對總體結果進行總結性描述并簡要分析試驗結果，對本次臨床研究有無特別說明，最后給出臨床試驗結論。
四、參考文獻
1. 《體外診斷試(shi)劑注冊管理辦法（試(shi)行(xing)）》，（國食藥監械[2007]229號），2007年(nian)4月(yue)19日。
2. 《體外診斷試劑(ji)臨床研究技術指導原則》，（國(guo)食(shi)藥(yao)監(jian)械[2007]240號），2007年4月28日(ri)。
3. 《全(quan)國艾(ai)滋病檢(jian)測技術(shu)規范(fan)》
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