邻居少妇张开双腿让我爽一夜_好男人日本社区www_久久夜色精品国产欧美乱_久久精品国产99久久丝袜

　　本指(zhi)(zhi)南旨在幫助北(bei)京市醫(yi)療器(qi)械生(sheng)(sheng)產(chan)監(jian)管人(ren)員增(zeng)強對無菌檢(jian)驗(yan)(yan)相關知(zhi)識的認識，指(zhi)(zhi)導和規(gui)范全市醫(yi)療器(qi)械生(sheng)(sheng)產(chan)監(jian)管人(ren)員對醫(yi)療器(qi)械生(sheng)(sheng)產(chan)企業無菌檢(jian)驗(yan)(yan)過程控(kong)制水平的監(jian)督(du)檢(jian)查工作，同時，為醫(yi)療器(qi)械生(sheng)(sheng)產(chan)企業（以下簡稱生(sheng)(sheng)產(chan)企業）在無菌檢(jian)驗(yan)(yan)的過程管理要求提供(gong)參考(kao)和依據。

　　當國家相關法規、標準、檢(jian)查要求發生變化(hua)時，應重新修訂(ding)本指南。

　　一(yi)、適用范圍

　　本(ben)指南(nan)適用(yong)于北京市藥品監督管(guan)理(li)局組織、實施的《醫(yi)療器械(xie)生(sheng)(sheng)產(chan)企(qi)業許(xu)可(ke)證》核發(fa)、變更、換(huan)證等(deng)現場檢查(cha)、醫(yi)療器械(xie)質量管(guan)理(li)體(ti)系(xi)考核、醫(yi)療器械(xie)生(sheng)(sheng)產(chan)質量管(guan)理(li)規范檢查(cha)、醫(yi)療器械(xie)生(sheng)(sheng)產(chan)日常監督等(deng)各項涉無(wu)菌檢驗的檢查(cha)。

　　二、檢查內(nei)容

　　檢(jian)查人員應在充(chong)分了解生產(chan)企(qi)業無(wu)(wu)菌檢(jian)驗活(huo)動的(de)(de)情況下，對其無(wu)(wu)菌檢(jian)驗過程的(de)(de)控制水平進行客觀(guan)的(de)(de)檢(jian)查和(he)評價。

　　一(yi)般情況下，檢查人員可按(an)照以下順序開(kai)展檢查工作(zuo)，并(bing)適時做好相(xiang)關(guan)記錄：

　　1、了解產(chan)品(pin)特性及生(sheng)產(chan)企(qi)業選擇的(de)(de)無(wu)菌(jun)(jun)檢(jian)驗(yan)方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)。常見的(de)(de)產(chan)品(pin)無(wu)菌(jun)(jun)檢(jian)查(cha)法(fa)(fa)(fa)(fa)包(bao)括直接(jie)接(jie)種法(fa)(fa)(fa)(fa)和薄膜過濾法(fa)(fa)(fa)(fa)。當(dang)建立(li)產(chan)品(pin)的(de)(de)無(wu)菌(jun)(jun)檢(jian)查(cha)方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)時，生(sheng)產(chan)企(qi)業應(ying)(ying)進(jin)行方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)的(de)(de)驗(yan)證(zheng)(zheng)，以證(zheng)(zheng)明所采用(yong)的(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)能(neng)夠給(gei)出正確的(de)(de)結果。若該產(chan)品(pin)的(de)(de)組(zu)分或原檢(jian)驗(yan)條(tiao)件發生(sheng)改變時，檢(jian)查(cha)方(fang)法(fa)(fa)(fa)(fa)應(ying)(ying)重新驗(yan)證(zheng)(zheng)。驗(yan)證(zheng)(zheng)時，應(ying)(ying)按供(gong)試(shi)品(pin)無(wu)菌(jun)(jun)檢(jian)查(cha)的(de)(de)規定及有關要求(qiu)進(jin)行操作。對(dui)藥典(dian)規定的(de)(de)每一(yi)試(shi)驗(yan)菌(jun)(jun)應(ying)(ying)逐一(yi)進(jin)行驗(yan)證(zheng)(zheng)。驗(yan)證(zheng)(zheng)試(shi)驗(yan)也可與供(gong)試(shi)品(pin)的(de)(de)無(wu)菌(jun)(jun)檢(jian)查(cha)同時進(jin)行。

　　2、了(le)解檢驗人(ren)員(yuan)的專業背景、培訓情(qing)況及(ji)工作經歷(li)。可通過查看(kan)學歷(li)證(zheng)書、培訓證(zheng)書或當面詢問檢驗人(ren)員(yuan)的方式，檢查無菌檢驗人(ren)員(yuan)是否具(ju)備微生物(wu)專業知(zhi)識，并經過無菌技(ji)術的培訓。

　　3、現場察看無菌(jun)(jun)實驗室(shi)。無菌(jun)(jun)檢查應在環境潔(jie)凈(jing)度(du)10000 級下的(de)局部(bu)潔(jie)凈(jing)度(du) 100 級的(de)單向流空氣區(qu)域(yu)內(nei)（如在萬級潔(jie)凈(jing)間內(nei)配置(zhi)超(chao)凈(jing)工作(zuo)臺等）中進行，其(qi)全過程必須嚴格(ge)遵守無菌(jun)(jun)操作(zuo)，防止微生物(wu)污染。單向流空氣區(qu)、工作(zuo)臺面及環境應定期監測。

　　4、現場察看(kan)無(wu)菌試(shi)驗所需的(de)設備和器具。其中(zhong)，

　　主要設(she)備包括(kuo)：恒(heng)溫(wen)培養箱(xiang)（真菌(jun)、細菌(jun)）、恒(heng)溫(wen)水浴箱(xiang)、壓力蒸汽滅(mie)菌(jun)器(qi)、電熱干(gan)燥箱(xiang)、電子天(tian)平、光學顯微鏡(jing)、集菌(jun)儀、過濾裝置（無(wu)油真空(kong)泵、濾杯、濾頭(tou)、濾瓶、微孔濾膜、夾子）等；（從試驗安全性考慮，建議陽性對照試驗使用生物安全柜）

　　主要(yao)器具有(you)：試管(guan)及試管(guan)架、酒精燈、75％乙醇棉、滅菌(jun)(jun)刻度吸管(guan)(1ml)、滅菌(jun)(jun)平皿(min)（9cm）、錐(zhui)形瓶、三角燒瓶、滅菌(jun)(jun)剪刀、鑷子(zi)等。

　　生(sheng)產企業應(ying)采用(yong)(yong)可靠方(fang)法對與(yu)供(gong)試液接觸的(de)所有器(qi)具滅菌(jun)，通常置(zhi)壓力蒸汽滅菌(jun)器(qi)內121℃30分(fen)鐘，或置(zhi)電熱干燥箱內160℃2小(xiao)時。器(qi)具滅菌(jun)后(hou)必須做好標識，標明滅菌(jun)的(de)時間(jian)和使用(yong)(yong)有效期。器(qi)皿在滅菌(jun)后(hou)，最(zui)多1周(zhou)即(ji)用(yong)(yong)完(wan)。檢(jian)查時還應(ying)注意清點培(pei)養皿的(de)個數(shu)，與(yu)試驗記錄中反映(ying)的(de)培(pei)養基個數(shu)是(shi)否一(yi)致。

　　5、對照生產企業有關(guan)無菌(jun)試驗的管理(li)制度、操作規(gui)程(cheng)等相關(guan)技術(shu)文件，要求檢驗人員(yuan)當場操作或口述無菌(jun)檢驗的過程(cheng)。

　　（1）培(pei)養(yang)基(ji)制(zhi)備

　　生(sheng)產企(qi)業可(ke)(ke)按藥典中的處(chu)方制(zhi)(zhi)備培(pei)養(yang)基(ji)，亦可(ke)(ke)使(shi)用按該(gai)處(chu)方生(sheng)產的符合(he)規定(ding)的脫水培(pei)養(yang)基(ji)。配制(zhi)(zhi)后應(ying)采(cai)用驗證合(he)格(ge)的滅菌(jun)程序(xu)滅菌(jun)。制(zhi)(zhi)備好的培(pei)養(yang)基(ji)應(ying)保存(cun)在(zai)2℃～25℃、避光(guang)的環境，若保存(cun)于(yu)(yu)非密閉(bi)容器中，一(yi)般在(zai)3周內(nei)使(shi)用；若保存(cun)于(yu)(yu)密閉(bi)容器中，一(yi)般可(ke)(ke)在(zai)1年內(nei)使(shi)用。

　　無菌(jun)(jun)檢(jian)查(cha)用的(de)硫乙(yi)醇酸鹽流(liu)體培養基(ji)及改良馬丁培養基(ji)等應符(fu)合培養基(ji)的(de)無菌(jun)(jun)性檢(jian)查(cha)及靈敏(min)度檢(jian)查(cha)的(de)要求。檢(jian)查(cha)可在供(gong)試品的(de)無菌(jun)(jun)檢(jian)查(cha)前或與供(gong)試品的(de)無菌(jun)(jun)檢(jian)查(cha)同時進行。

　　（2）供試品的無菌(jun)檢查

　　無(wu)菌(jun)檢查法(fa)(fa)包括薄膜過(guo)濾法(fa)(fa)和(he)(he)直接接種法(fa)(fa)。只要供(gong)(gong)試品性(xing)狀允許，應采(cai)用薄膜過(guo)濾法(fa)(fa)。供(gong)(gong)試品無(wu)菌(jun)檢查所采(cai)用的檢查方法(fa)(fa)和(he)(he)檢驗(yan)(yan)條件應與驗(yan)(yan)證(zheng)的方法(fa)(fa)相同。無(wu)菌(jun)試驗(yan)(yan)過(guo)程中，若需使用表面活性(xing)劑、滅活劑、中和(he)(he)劑等試劑，應證(zheng)明其(qi)有效性(xing)，且(qie)對微生物無(wu)毒性(xing)。

　　無(wu)(wu)菌操作時，對供試品容器(qi)(qi)(qi)表面應用適宜的(de)消毒(du)液進(jin)行(xing)徹(che)底消毒(du)，如(ru)果(guo)供試品容器(qi)(qi)(qi)內有一(yi)定的(de)真(zhen)空(kong)度，可用適宜的(de)無(wu)(wu)菌器(qi)(qi)(qi)材(cai)（如(ru)帶有除菌過濾器(qi)(qi)(qi)的(de)針頭）向容器(qi)(qi)(qi)內導入無(wu)(wu)菌空(kong)氣，再(zai)按無(wu)(wu)菌操作起開容器(qi)(qi)(qi)取出內容物。

　　（3）培(pei)養及觀察

　　含培(pei)養(yang)(yang)基(ji)的(de)容(rong)器按規定的(de)溫度培(pei)養(yang)(yang)14天(tian)(tian)。培(pei)養(yang)(yang)期間應逐日觀(guan)察并(bing)記錄是否有菌(jun)(jun)生長。如在(zai)(zai)加入(ru)供試品(pin)后、或在(zai)(zai)培(pei)養(yang)(yang)過程中(zhong)(zhong)，培(pei)養(yang)(yang)基(ji)出現渾(hun)(hun)濁，培(pei)養(yang)(yang)14天(tian)(tian)后，不(bu)能從外觀(guan)上判斷(duan)有無微生物(wu)生長，可取該培(pei)養(yang)(yang)液(ye)適量轉種(zhong)至同(tong)種(zhong)新鮮培(pei)養(yang)(yang)基(ji)中(zhong)(zhong)，細(xi)菌(jun)(jun)培(pei)養(yang)(yang)2天(tian)(tian)、真菌(jun)(jun)培(pei)養(yang)(yang)3天(tian)(tian)，觀(guan)察接種(zhong)的(de)同(tong)種(zhong)新鮮培(pei)養(yang)(yang)基(ji)是否再出現渾(hun)(hun)濁；或取培(pei)養(yang)(yang)液(ye)涂片，染色，鏡檢，判斷(duan)是否有菌(jun)(jun)。

　　在(zai)觀察試驗(yan)結果的過程中(zhong)，還應考慮假陰(yin)性(xing)的影響(xiang)(xiang)。其中(zhong)影響(xiang)(xiang)假陰(yin)性(xing)發(fa)生(sheng)的因素(su)有：培(pei)養條(tiao)件不能支持(chi)微(wei)生(sheng)物的生(sheng)長（促生(sheng)長試驗(yan)）；在(zai)無菌(jun)試驗(yan)中(zhong)，產品(pin)中(zhong)釋放出了殺菌(jun)或微(wei)生(sheng)物電解的物質(zhi)（消除抑菌(jun)物質(zhi)）；從滅(mie)菌(jun)處理(li)到培(pei)養有一(yi)定(ding)的時(shi)間間隔（確定(ding)滅(mie)菌(jun)后產品(pin)的儲存(cun)條(tiao)件及儲存(cun)時(shi)間）。

　　（4）結(jie)果判斷(duan)

　　生產企業應按(an)照(zhao)如下標準進行判斷(duan)：

　　①若供(gong)試(shi)品(pin)管(guan)均澄清，或(huo)雖顯(xian)渾濁但經確證(zheng)無(wu)(wu)(wu)菌(jun)生長，判供(gong)試(shi)品(pin)符合(he)規定；②若供(gong)試(shi)品(pin)管(guan)中任何一(yi)管(guan)顯(xian)渾濁并確證(zheng)有菌(jun)生長，判供(gong)試(shi)品(pin)不符合(he)規定，除非(fei)能充分(fen)證(zheng)明試(shi)驗(yan)結果無(wu)(wu)(wu)效，即生長的微生物(wu)非(fei)供(gong)試(shi)品(pin)所(suo)含。陽性(xing)對照管(guan)應生長良好，陰性(xing)對照管(guan)不得有菌(jun)生長，否則試(shi)驗(yan)無(wu)(wu)(wu)效。

　　當符(fu)合(he)下(xia)列至少一個條件時，方(fang)可(ke)判試(shi)驗結果無(wu)效：①無(wu)菌(jun)檢(jian)查(cha)試(shi)驗所用的(de)設備及環境(jing)的(de)微(wei)生物監控結果不符(fu)合(he)無(wu)菌(jun)檢(jian)查(cha)法的(de)要求；②回顧無(wu)菌(jun)試(shi)驗過程，發現有可(ke)能引(yin)起微(wei)生物污染的(de)因(yin)素(su)；③供(gong)試(shi)品管中生長的(de)微(wei)生物經鑒定后，確證是因(yin)無(wu)菌(jun)試(shi)驗中所使用的(de)物品和（或）無(wu)菌(jun)操作(zuo)技術不當引(yin)起的(de)。

試(shi)(shi)(shi)驗若經確認無效(xiao)，應重(zhong)試(shi)(shi)(shi)。重(zhong)試(shi)(shi)(shi)時(shi)，重(zhong)新取同量供(gong)試(shi)(shi)(shi)品，依法重(zhong)試(shi)(shi)(shi)，若無菌(jun)(jun)生長，判供(gong)試(shi)(shi)(shi)品符(fu)合(he)(he)規(gui)(gui)定(ding)；若有(you)菌(jun)(jun)生長，判供(gong)試(shi)(shi)(shi)品不符(fu)合(he)(he)規(gui)(gui)定(ding)。

　　6、查(cha)閱(yue)試驗記錄。完整的試驗記錄應明確包含下(xia)列幾類信(xin)息(xi)：

　　（1）樣(yang)(yang)品(pin)(pin)記錄，至少應包括：取(qu)(qu)樣(yang)(yang)日期、樣(yang)(yang)品(pin)(pin)名稱、樣(yang)(yang)品(pin)(pin)規格、樣(yang)(yang)品(pin)(pin)批號、取(qu)(qu)樣(yang)(yang)地點、取(qu)(qu)樣(yang)(yang)方(fang)式、取(qu)(qu)樣(yang)(yang)人(ren)、原始試驗記錄序號。

　　（2）滅菌物品制作(zuo)記錄

　　①培養(yang)基(ji)：培養(yang)基(ji)名稱、培養(yang)基(ji)批號、培養(yang)基(ji)用量(liang)（g）、蒸(zheng)餾水用量(liang)（ml）、培養(yang)基(ji)分裝數量(liang)、滅菌(jun)日期、滅菌(jun)的(de)實際溫(wen)度和壓力、滅菌(jun)時間、制作人、培養(yang)基(ji)存放地點和有效期等。

　　②器(qi)具(ju)：器(qi)具(ju)名稱、器(qi)具(ju)數量(liang)、滅(mie)菌(jun)日期、滅(mie)菌(jun)的實際溫度(du)和壓力、滅(mie)菌(jun)時間、制作人、器(qi)具(ju)存放地點、有效期等(deng)。

　　（3）原始試(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan)記(ji)錄(lu)，至少應(ying)包括(kuo)：記(ji)錄(lu)名稱(cheng)、記(ji)錄(lu)序號、樣(yang)(yang)品(pin)(pin)名稱(cheng)、樣(yang)(yang)品(pin)(pin)唯(wei)一性標(biao)識（例(li)如：樣(yang)(yang)品(pin)(pin)號）、樣(yang)(yang)品(pin)(pin)規格、樣(yang)(yang)品(pin)(pin)批(pi)號、滅菌批(pi)號、樣(yang)(yang)品(pin)(pin)數量、取(qu)樣(yang)(yang)日期、檢(jian)(jian)驗(yan)(yan)日期、檢(jian)(jian)驗(yan)(yan)依據、主要試(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan)設(she)備及器具(ju)、試(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan)方法、試(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan)環(huan)境條件、試(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan)結(jie)果（每日觀察的(de)結(jie)果）、試(shi)(shi)(shi)驗(yan)(yan)結(jie)論、檢(jian)(jian)測(ce)人、復核人等。

　　（4）廢棄(qi)物(wu)處(chu)理記錄，至少應包括：廢棄(qi)物(wu)形(xing)態（固體、液體）、廢棄(qi)物(wu)數量(liang)、滅菌時間和壓力(li)、經辦人(ren)、處(chu)理日期(qi)等。

　　三、其(qi)它應注意(yi)的問題(ti)

　　1、生產企(qi)業應(ying)確(que)保樣(yang)品(pin)具有代(dai)表(biao)性：試(shi)驗(yan)(yan)樣(yang)品(pin)應(ying)從常(chang)規產品(pin)中能夠代(dai)表(biao)加工過程和(he)條(tiao)件(jian)的(de)(de)(de)(de)(de)批中選擇(ze)。選擇(ze)樣(yang)品(pin)是隨機(ji)的(de)(de)(de)(de)(de)。試(shi)驗(yan)(yan)樣(yang)品(pin)的(de)(de)(de)(de)(de)選擇(ze)和(he)處理技術應(ying)明(ming)確(que)，以(yi)免對(dui)樣(yang)品(pin)上所含的(de)(de)(de)(de)(de)微(wei)生物的(de)(de)(de)(de)(de)數量和(he)種類造(zao)成污染和(he)改變。試(shi)驗(yan)(yan)樣(yang)品(pin)可以(yi)選擇(ze)制造(zao)過程中的(de)(de)(de)(de)(de)不(bu)合格(ge)產品(pin)，它們應(ying)該代(dai)表(biao)這個生產批的(de)(de)(de)(de)(de)加工程序和(he)條(tiao)件(jian)。用于試(shi)驗(yan)(yan)的(de)(de)(de)(de)(de)不(bu)合格(ge)產品(pin)應(ying)不(bu)會影響無(wu)菌測試(shi)的(de)(de)(de)(de)(de)有效性。

　　2、生產企業對于供(gong)試品的(de)選取(qu)、轉移過程要采取(qu)防止(zhi)污染措施，確保試驗(yan)結果的(de)可(ke)靠性(xing)。選取(qu)制作供(gong)試品的(de)試驗(yan)樣品時，樣品包裝須完好無(wu)損，尤其是只有(you)一層包裝的(de)樣品。進入無(wu)菌(jun)檢驗(yan)室的(de)樣品若有(you)兩(liang)層（或兩(liang)層以(yi)上）包裝的(de)，需將(jiang)外包裝在傳遞(di)窗（或緩(huan)沖間）拆(chai)除后，傳入實驗(yan)室。

　　3、無菌檢驗中(zhong)接觸供試(shi)品的(de)試(shi)驗用(yong)具溫度不(bu)(bu)能(neng)過高以防可能(neng)存在的(de)菌被燙(tang)死。對(dui)不(bu)(bu)同種類(lei)和不(bu)(bu)同批次(ci)的(de)產品，在拆(chai)包裝及(ji)夾取(qu)樣品時，應更換試(shi)驗用(yong)具（如：剪刀、鑷(nie)子(zi)）。

　　4、進入無(wu)菌操作(zuo)室的所有培(pei)養(yang)(yang)基、供(gong)試品等的外表都應(ying)采用適用的方法進行消毒處理（如(ru)：紫外燈(deng)照射不少于30分鐘），以避免(mian)將外包裝(zhuang)污(wu)染的微生物(wu)帶(dai)入無(wu)菌檢驗室。出具試驗結果后，所有培(pei)養(yang)(yang)物(wu)須經121℃高壓滅(mie)菌30分鐘的處理。

　　5、由于無菌檢驗時間跨度較長，因此過程的記錄應能夠完整體現試驗的全過程，對于在試驗過程中出現的各種情況，均應在記錄中客觀反映。
　　參考資料一：

　　常(chang)見的名(ming)詞解釋

　　1、滅菌：殺滅或除去特定環境或物品中一切微生物的過程。目前國際上規定，滅菌過程必須使滅菌物品污染的微生物存活率減少到10^-6及以下。

　　2、微(wei)(wei)生(sheng)物：在顯微(wei)(wei)鏡下(xia)才(cai)能看到的微(wei)(wei)小實(shi)體(ti)，包(bao)括細菌、真菌、原(yuan)生(sheng)動物和病(bing)毒。

　　3、無菌(jun)技術：是指在微(wei)生物試驗工(gong)作中，控制或防止(zhi)各(ge)類微(wei)生物的污染(ran)及(ji)其(qi)干擾的一系列操作方法和有關措施，其(qi)中包括無菌(jun)環境設(she)施、無菌(jun)試驗器材以(yi)及(ji)無菌(jun)操作。

　　4、無(wu)菌(jun)操(cao)作：是指(zhi)在(zai)(zai)無(wu)菌(jun)環境(jing)條件下，在(zai)(zai)對無(wu)菌(jun)制品(pin)或無(wu)菌(jun)器械進行檢驗的過程中，能防止微生(sheng)物污(wu)染(ran)與干擾的一種(zhong)常規操(cao)作方法。

　　5、培(pei)養(yang)(yang)條件(jian)：用于促進微(wei)生物(wu)發育、生長(chang)和繁殖的(de)(de)生長(chang)培(pei)養(yang)(yang)基和培(pei)養(yang)(yang)方式的(de)(de)組(zu)合。

　　6、需(xu)氧菌：在代(dai)謝中，有氧條件(jian)下才(cai)能(neng)生(sheng)存的微(wei)生(sheng)物。

　　7、厭(yan)氧(yang)菌：在代謝中，沒有氧(yang)的條件下才能生存的微(wei)生物。

　　8、抑細菌(jun)/抑霉(mei)菌(jun)試(shi)驗：用(yong)選定的(de)微(wei)(wei)生物(wu)(wu)來(lai)演(yan)示(shi)某些(xie)物(wu)(wu)質的(de)存(cun)在能夠(gou)抑制(zhi)這些(xie)微(wei)(wei)生物(wu)(wu)的(de)繁殖。

　　9、促生長試驗：用(yong)于證明生長培養基能夠支持微生物生長的技術操作。

　　10、假陰(yin)性(xing)：實際陽性(xing)的無菌試驗結果被變成(cheng)了陰(yin)性(xing)。

　　11、假陽(yang)性：實際陰性的無菌試驗結果被(bei)變成了陽(yang)性。

　　12、生物指示物：對特定(ding)滅菌工藝有確(que)定(ding)的抗(kang)力，可供(gong)使(shi)用的微生物檢驗器材。

　　13、化(hua)學(xue)指(zhi)示物：根(gen)據(ju)暴露于某(mou)種滅菌工(gong)藝所(suo)產生的(de)化(hua)學(xue)或物理變(bian)化(hua)，在(zai)一(yi)個(ge)或多個(ge)預(yu)定工(gong)藝參(can)數上顯(xian)示變(bian)化(hua)的(de)指(zhi)示器(qi)材。

　　14、無菌(jun)保證水平（SAL）:滅(mie)菌(jun)后產品上存在單(dan)個活微生(sheng)物的概(gai)率(lv)。

　　參考(kao)資(zi)料二：

　　無菌(jun)室空(kong)氣中菌(jun)落數的檢(jian)查

　　無(wu)(wu)(wu)菌(jun)室(shi)在消毒處理完畢后，應檢(jian)(jian)查空(kong)氣中的(de)(de)菌(jun)落數(shu)。方法(fa)(fa)如下：取(qu)直徑約(yue)90mm培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)皿(min)，無(wu)(wu)(wu)菌(jun)操作(zuo)注(zhu)入(ru)融化的(de)(de)營養(yang)(yang)(yang)瓊脂培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基約(yue)20mL，在30℃～35℃培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)48小時證明無(wu)(wu)(wu)菌(jun)后，取(qu)3只培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)皿(min)在無(wu)(wu)(wu)菌(jun)室(shi)操作(zuo)臺或超凈(jing)工作(zuo)臺平(ping)均(jun)(jun)位置打(da)開(kai)上(shang)(shang)(shang)蓋，暴露(lu)30分鐘后蓋好(hao)，置30℃～35℃培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)48小時后取(qu)出檢(jian)(jian)查，3只雙碟(die)上(shang)(shang)(shang)生長的(de)(de)菌(jun)落數(shu)平(ping)均(jun)(jun)不得超過(guo)1個。無(wu)(wu)(wu)菌(jun)試(shi)(shi)(shi)驗過(guo)程中應檢(jian)(jian)查空(kong)氣中的(de)(de)菌(jun)落數(shu)，方法(fa)(fa)同上(shang)(shang)(shang)。在試(shi)(shi)(shi)驗開(kai)始進行時打(da)開(kai)平(ping)皿(min)蓋，至(zhi)試(shi)(shi)(shi)驗結束蓋好(hao)照上(shang)(shang)(shang)法(fa)(fa)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)，應符(fu)合上(shang)(shang)(shang)述(shu)要求(qiu)。

　　參考資料三：

　　供試品數量的(de)選擇

　　檢(jian)(jian)驗數(shu)(shu)(shu)(shu)量是指一次試(shi)驗所用(yong)供試(shi)品(pin)最(zui)小包裝容(rong)器的數(shu)(shu)(shu)(shu)量。除另有規(gui)定外(wai)，出廠(chang)產品(pin)按(an)藥(yao)典附錄ⅩⅢ B中表1規(gui)定；上(shang)市(shi)產品(pin)監督檢(jian)(jian)驗按(an)表2、表3規(gui)定。表1、表2、表3中最(zui)少檢(jian)(jian)驗數(shu)(shu)(shu)(shu)量不包括陽(yang)性(xing)對(dui)照試(shi)驗的供試(shi)品(pin)用(yong)量。一般情(qing)況(kuang)下，供試(shi)品(pin)無菌檢(jian)(jian)查(cha)若采(cai)用(yong)薄膜過濾法，應(ying)增加1/2的最(zui)小檢(jian)(jian)驗數(shu)(shu)(shu)(shu)量作(zuo)陽(yang)性(xing)對(dui)照用(yong)；若采(cai)用(yong)直接(jie)(jie)接(jie)(jie)種法，應(ying)增加供試(shi)品(pin)1 支（或瓶）作(zuo)陽(yang)性(xing)對(dui)照用(yong)。執行GB/T14233.2的供試(shi)品(pin)數(shu)(shu)(shu)(shu)量應(ying)滿足(zu)同(tong)一批號3～11個(ge)單位(wei)供試(shi)品(pin)。

　　檢驗量(liang)(liang)是(shi)指一次(ci)試驗所用的(de)(de)供(gong)試品(pin)(pin)總量(liang)(liang)（g或(huo)ml）。除另有規定外(wai)，每(mei)份培養基接種(zhong)的(de)(de)供(gong)試品(pin)(pin)量(liang)(liang)按(an)表(biao)2、表(biao)3規定。若每(mei)支（瓶）供(gong)試品(pin)(pin)的(de)(de)裝(zhuang)量(liang)(liang)按(an)規定足夠接種(zhong)兩份培養基，則(ze)應分別接種(zhong)硫乙醇酸鹽流體培養基和改良馬丁培養基。采(cai)用薄膜(mo)過濾法時(shi)，檢驗量(liang)(liang)應不少于(yu)直接接種(zhong)法的(de)(de)總接種(zhong)量(liang)(liang)，只要供(gong)試品(pin)(pin)特(te)性允許(xu)，應將所有容器內的(de)(de)全部內容物(wu)過濾。

表1 批出(chu)廠產品最(zui)少(shao)量檢(jian)驗數(shu)量

　　注:若每(mei)個容(rong)器(qi)中(zhong)的裝量(liang)不(bu)足接(jie)種兩種培養基(ji),那么(me)表中(zhong)的檢驗數量(liang)應加倍(bei)

表2 上市抽驗樣品(液(ye)體(ti)制劑(ji))的最少檢驗量(liang)

①每種(zhong)培養基各接種(zhong)10支供試(shi)品.

表3 上市(shi)抽驗樣品(固體(ti)制劑)的(de)最少檢驗量(liang)

　　①每種(zhong)培養基各接(jie)種(zhong)10支供試品

　　②桶裝固體原料(liao)的最少(shao)檢驗數量為4個包裝

　　參考資料四：

　　培養基的(de)制備

　　培養(yang)應注(zhu)意培養(yang)條(tiao)件(jian)：硫乙(yi)醇酸(suan)鹽流體培養(yang)基(ji) 30～35℃14天；改良馬丁培養(yang)基(ji) 23～28℃14天。選擇(ze)培養(yang)條(tiao)件(jian)需考慮的(de)因素：產品的(de)性(xing)質、制造方(fang)法、潛在的(de)微生(sheng)物污染來(lai)源、可能(neng)遇到(dao)的(de)微生(sheng)物種(zhong)類。硫乙(yi)醇酸(suan)鹽流體培養(yang)基(ji)必須(xu)在煮沸后，再進行(xing)分裝、滅菌。

　　1、硫乙醇(chun)酸鹽流(liu)體培養基

　　酪胨 (胰(yi)酶水解) 15.0g、酵母浸出(chu)粉 5.0g、葡(pu)萄糖 5.0g、氯化鈉 2.5g、L-胱氨酸 0.5g、新配制(zhi)的(de)0.1%刃天青溶液 1.0 ml、硫乙醇酸鈉 0.5g(或硫乙醇酸 0.3ml)、瓊脂 0.75g、水 1000 ml

　　除葡萄(tao)糖和(he)刃(ren)天(tian)青溶(rong)液(ye)(ye)外(wai)，取上述成分混合(he)，微溫(wen)溶(rong)解(jie)，調節 pH 為弱堿性(xing)，煮(zhu)沸，濾清(qing)，加(jia)(jia)入葡萄(tao)糖和(he)刃(ren)天(tian)青溶(rong)液(ye)(ye)，搖勻，調節 pH 值使(shi)滅菌后為 7.1±0.2。分裝至適宜的(de)容器中，其裝量與容器高(gao)度(du)的(de)比(bi)例應符合(he)培(pei)(pei)養(yang)結束后培(pei)(pei)養(yang)基氧化層（粉紅色）不超(chao)過培(pei)(pei)養(yang)基深度(du)的(de) 1/2。滅菌。在供試品接種前，培(pei)(pei)養(yang)基氧化層的(de)高(gao)度(du)不得超(chao)過培(pei)(pei)養(yang)基深度(du)的(de) 1/5 ，否則，須(xu)經 100 ℃水(shui)浴加(jia)(jia)熱(re)至粉紅色消失(shi)（不超(chao)過 20 分鐘），迅速(su)冷卻，只限加(jia)(jia)熱(re)一(yi)次，并防(fang)止被污(wu)染。

硫乙醇酸鹽流體培養(yang)基置 30℃～35℃培養(yang)。

　　2、改良(liang)馬丁培(pei)養基

　　胨 5.0g、磷酸氫二鉀(jia) 1.0g、酵母浸出粉(fen) 2.0g、硫酸鎂 0.5g、葡(pu)萄(tao)糖(tang) 20.0g、水 1000 ml

　除葡萄糖(tang)外，取上述成分混合，微溫溶解，調節pH值(zhi)約(yue)為(wei)(wei)6.8，煮沸，加(jia)入(ru)葡萄糖(tang)溶解后(hou)，搖勻，濾清(qing)，調節pH值(zhi)使滅(mie)菌后(hou)為(wei)(wei)6.4±0.2，分裝(zhuang)，滅(mie)菌。

改(gai)良馬丁培(pei)養(yang)基(ji)置 23℃～28℃培(pei)養(yang)。

　　3、選擇性培養基

　　按上(shang)述硫乙醇酸鹽流體培養(yang)基(ji)(ji)或改良馬(ma)丁(ding)培養(yang)基(ji)(ji)的處方及制法，在培養(yang)基(ji)(ji)滅(mie)菌或使(shi)用前(qian)加入(ru)適宜的中和劑(ji)、滅(mie)活(huo)劑(ji)或表面活(huo)性劑(ji)，其用量同驗證試驗。

　　4、營養肉湯培養基

　　胨 10.0g、氯化(hua)鈉 5.0g、牛肉浸出粉(fen) 3.0g、水 1000 ml

　　取上(shang)述成(cheng)分混合，微溫溶解，調節 pH 為(wei)弱堿(jian)性，煮沸，濾清，調節pH值使滅菌后(hou)為(wei) 7.2±0.2，分裝，滅菌。

　　5、營養瓊脂培養基

　　按上述營養肉湯培養基的處方(fang)及制法，加入14.0g瓊(qiong)脂，調節pH 值使滅菌后為7.2±0.2，分裝，滅菌。

　　6、改良(liang)馬丁瓊脂(zhi)培養基(ji)

　　按改良馬丁培養基的處方及制法，加入14.0g 瓊脂，調節pH值使滅菌后為6.4±0.2，分裝，滅菌。
　　參考資料五：

　　培養基的適用性檢查

　　1、無(wu)菌(jun)性檢(jian)查：每批培養(yang)基隨(sui)機取不少于5支（瓶），培養(yang)14天，應(ying)無(wu)菌(jun)生長(chang)。

　　2、靈敏度檢(jian)查

　　菌(jun)種(zhong)(zhong)：培(pei)養基靈(ling)敏度檢查(cha)所用的(de)菌(jun)株傳代次數不得超過5代（從菌(jun)種(zhong)(zhong)保(bao)(bao)存(cun)中心獲得的(de)冷凍(dong)干(gan)燥菌(jun)種(zhong)(zhong)為第0代），試驗用菌(jun)種(zhong)(zhong)應(ying)采用適宜的(de)菌(jun)種(zhong)(zhong)保(bao)(bao)存(cun)技術進行保(bao)(bao)存(cun)，以保(bao)(bao)證試驗菌(jun)株的(de)生物(wu)學特(te)性。

　　金(jin)黃(huang)色葡(pu)萄(tao)球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC(B) 26 003〕

　　銅綠假單胞菌(jun)(Pseudomonas aeruginosa) 〔CMCC(B) 10 104〕

　　枯草芽孢(bao)桿菌(jun)（Bacillus subtilis）〔CMCC（B）63 501〕

　　生孢梭菌(jun)(Clostridium sporogenes)〔CMCC(B) 64 941〕

　　白色(se)念(nian)珠(zhu)菌(Candida albicans)〔CMCC(F) 98 001〕

　　黑曲霉(Aspergillus niger) 〔CMCC(F) 98 003〕

　　3、菌液制備

　　接種金黃色葡(pu)萄球菌(jun)、銅綠(lv)假單胞菌(jun)、枯草芽(ya)孢(bao)(bao)桿菌(jun)的新鮮培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)物(wu)至(zhi)營(ying)(ying)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)肉湯培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)中(zhong)或營(ying)(ying)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)瓊脂培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)上，接種生(sheng)孢(bao)(bao)梭菌(jun)的新鮮培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)物(wu)至(zhi)硫乙醇酸鹽流體培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)中(zhong)，30℃～35℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)18小時(shi)～24小時(shi)；接種白色念珠菌(jun)的新鮮培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)物(wu)至(zhi)改良(liang)馬(ma)丁培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)中(zhong)或改良(liang)馬(ma)丁瓊脂培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)上，23～28℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)24～48小時(shi)，上述培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)(yang)物(wu)用0.9%無(wu)菌(jun)氯(lv)化鈉(na)溶液(ye)制成每1ml 含菌(jun)數小于100cfu（菌(jun)落形成單位）的菌(jun)懸液(ye)。

　　接種黑曲霉的(de)新鮮培(pei)養物至改良馬丁瓊脂斜(xie)面培(pei)養基上，23～28℃培(pei)養5～7天，加入3～5ml含(han)(han)0.05％（v/v）聚(ju)山梨(li)酯80的(de)0.9%無菌氯(lv)化鈉溶液，將孢子(zi)洗(xi)脫(tuo)。然后，用適宜的(de)方法吸出孢子(zi)懸液至無菌試管內，用含(han)(han)0.05％（v/v）聚(ju)山梨(li)酯80的(de)0.9%無菌氯(lv)化鈉溶液制成每1ml 含(han)(han)孢子(zi)數小于(yu)100cfu的(de)孢子(zi)懸液。

　　菌懸(xuan)(xuan)液在室溫下放(fang)置(zhi)應在2小時內(nei)使用，若(ruo)保(bao)存在2～8℃可在24小時內(nei)使用。黑(hei)曲霉(mei)孢(bao)子懸(xuan)(xuan)液可保(bao)存在2～8℃，在驗證過的貯(zhu)存期內(nei)使用。

　　4、培養基接種

　　取每(mei)(mei)管(guan)裝量為12ml的(de)(de)硫乙醇酸鹽流體培(pei)(pei)養(yang)基9支(zhi)(zhi)，分(fen)(fen)別(bie)接(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)小(xiao)于100cfu的(de)(de)金黃色(se)葡萄球(qiu)菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌各(ge)2支(zhi)(zhi)，另1支(zhi)(zhi)不接(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)作(zuo)為空白(bai)對(dui)照(zhao)，培(pei)(pei)養(yang)3天(tian)(tian)；取每(mei)(mei)管(guan)裝量為9ml的(de)(de)改良馬丁培(pei)(pei)養(yang)基5支(zhi)(zhi),分(fen)(fen)別(bie)接(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)小(xiao)于100cfu 的(de)(de)白(bai)色(se)念珠菌、黑曲霉各(ge)2支(zhi)(zhi)，另1支(zhi)(zhi)不接(jie)種(zhong)(zhong)(zhong)作(zuo)為空白(bai)對(dui)照(zhao)，培(pei)(pei)養(yang)5天(tian)(tian)。逐日觀察結(jie)果。

　　5、結(jie)果判(pan)定

　　空白對照管應無菌(jun)生長，若加(jia)菌(jun)的(de)培養(yang)基管均生長良好，判該培養(yang)基的(de)靈敏度檢查(cha)符(fu)合(he)規定。

　　參考資料六：

　　方法(fa)驗證(zheng)試驗

　　1、菌種及菌液制備

　　除(chu)大腸埃(ai)(ai)希(xi)菌(jun)（Escherichia coli）[CMCC(B) 4 4102〕外(wai)，金黃色葡(pu)萄球(qiu)菌(jun)、枯草(cao)芽(ya)孢桿菌(jun)、生孢梭菌(jun)、白色念珠菌(jun)、黑曲霉(mei)同培(pei)養基靈敏度檢查。大腸埃(ai)(ai)希(xi)菌(jun)的菌(jun)液制備同金黃色葡(pu)萄球(qiu)菌(jun)。

　　2、薄膜過濾法

　　取每種培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)規(gui)定接種的(de)供試(shi)品總(zong)量按薄膜(mo)過濾(lv)(lv)法(fa)過濾(lv)(lv)，沖洗，在最(zui)后(hou)一次的(de)沖洗液中加(jia)入小于100cfu的(de)試(shi)驗(yan)菌，過濾(lv)(lv)。取出濾(lv)(lv)膜(mo)接種至硫(liu)乙醇酸鹽(yan)流體培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)或改良馬丁培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)中，或將培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)加(jia)至濾(lv)(lv)筒(tong)內。另取一裝有同體積(ji)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)的(de)容器，加(jia)入等量試(shi)驗(yan)菌，作(zuo)(zuo)為對(dui)照。置規(gui)定溫度培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)3～5天(tian)，各試(shi)驗(yan)菌同法(fa)操作(zuo)(zuo)。

　　3、直接(jie)接(jie)種法

　　取符合直接(jie)接(jie)種法培(pei)(pei)養(yang)基用(yong)量(liang)要(yao)求的(de)硫(liu)乙醇酸(suan)鹽流體培(pei)(pei)養(yang)基8管(guan)(guan)(guan)，分(fen)別接(jie)入小于100cfu的(de)金黃色葡(pu)萄球菌(jun)(jun)(jun)(jun)、大腸埃希菌(jun)(jun)(jun)(jun)、枯草芽孢桿菌(jun)(jun)(jun)(jun)、生(sheng)孢梭菌(jun)(jun)(jun)(jun)各2管(guan)(guan)(guan)，取符合直接(jie)接(jie)種法培(pei)(pei)養(yang)基用(yong)量(liang)要(yao)求的(de)改(gai)良馬丁培(pei)(pei)養(yang)基4管(guan)(guan)(guan)，分(fen)別接(jie)入小于100cfu的(de)白色念珠菌(jun)(jun)(jun)(jun)、黑曲(qu)霉各2管(guan)(guan)(guan)。其中1管(guan)(guan)(guan)接(jie)入每支(zhi)培(pei)(pei)養(yang)基規定量(liang)的(de)供試品量(liang)，另1管(guan)(guan)(guan)作為(wei)對照，按置規定的(de)溫(wen)度培(pei)(pei)養(yang)3～5天(tian)。

　　4、結果判斷

　　與對照管比較，如含(han)供(gong)試(shi)(shi)品(pin)(pin)各容(rong)器(qi)中的(de)(de)(de)(de)試(shi)(shi)驗菌(jun)(jun)(jun)均(jun)生長(chang)(chang)良好，則說(shuo)明(ming)供(gong)試(shi)(shi)品(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)該檢驗量在該檢驗條件(jian)下無抑菌(jun)(jun)(jun)作(zuo)(zuo)用(yong)或(huo)其抑菌(jun)(jun)(jun)作(zuo)(zuo)用(yong)可(ke)以忽(hu)略不計，照此檢查方(fang)(fang)法和(he)檢查條件(jian)進行供(gong)試(shi)(shi)品(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)無菌(jun)(jun)(jun)檢查。如含(han)供(gong)試(shi)(shi)品(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)任一容(rong)器(qi)中的(de)(de)(de)(de)試(shi)(shi)驗菌(jun)(jun)(jun)生長(chang)(chang)微(wei)弱、緩慢或(huo)不生長(chang)(chang)，則說(shuo)明(ming)供(gong)試(shi)(shi)品(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)該檢驗量在該檢驗條件(jian)下有抑菌(jun)(jun)(jun)作(zuo)(zuo)用(yong)，可(ke)采(cai)用(yong)增加沖洗量、增加培養基(ji)的(de)(de)(de)(de)用(yong)量、使(shi)用(yong)中和(he)劑(ji)或(huo)滅活劑(ji)、更換(huan)濾膜品(pin)(pin)種等方(fang)(fang)法，消(xiao)除供(gong)試(shi)(shi)品(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)抑菌(jun)(jun)(jun)作(zuo)(zuo)用(yong)，并重新(xin)進行方(fang)(fang)法驗證(zheng)試(shi)(shi)驗。

　　參(can)考(kao)資料(liao)七：

　　供試(shi)品處(chu)理及(ji)接種培養基

　　直接(jie)(jie)接(jie)(jie)種法(fa)：每(mei)個供(gong)試品(pin)按規(gui)定量分別接(jie)(jie)種至(zhi)各含硫乙醇酸(suan)鹽流體培(pei)(pei)養(yang)基和改良馬丁(ding)培(pei)(pei)養(yang)基的容器中(zhong)。除(chu)另(ling)有規(gui)定外，每(mei)個容器中(zhong)培(pei)(pei)養(yang)基的用量應符合接(jie)(jie)種的供(gong)試品(pin)體積(ji)(ji)不得(de)大于(yu)培(pei)(pei)養(yang)基體積(ji)(ji)的10%，同(tong)時，硫乙醇酸(suan)鹽流體培(pei)(pei)養(yang)基每(mei)管裝量不少(shao)于(yu)15ml，改良馬丁(ding)培(pei)(pei)養(yang)基每(mei)管裝量不少(shao)于(yu)10ml。

　　薄膜(mo)過(guo)濾法：將供試液(ye)混勻，過(guo)濾。如供試品(pin)具有(you)抑菌作用(yong)或含(han)防腐劑，須用(yong)適(shi)量的沖(chong)(chong)洗液(ye)沖(chong)(chong)洗濾膜(mo)，沖(chong)(chong)洗次(ci)數不得少于三(san)次(ci)。沖(chong)(chong)洗后，如用(yong)封閉式薄膜(mo)過(guo)濾器，分別將100ml硫乙醇酸(suan)(suan)鹽流(liu)體培(pei)(pei)養(yang)基及改(gai)良(liang)馬丁培(pei)(pei)養(yang)基加入相(xiang)應的濾筒內。如采用(yong)一(yi)般薄膜(mo)過(guo)濾器，取出濾膜(mo)，將其剪成 3等份，分別置于含(han)50ml 硫乙醇酸(suan)(suan)鹽流(liu)體培(pei)(pei)養(yang)基及改(gai)良(liang)馬丁培(pei)(pei)養(yang)基的容器中(zhong)，其中(zhong)一(yi)份做陽性(xing)對照用(yong)。

　　薄膜(mo)過(guo)濾(lv)法應優(you)先采用封(feng)閉式薄膜(mo)過(guo)濾(lv)器(qi)(qi)，也可使(shi)用一(yi)般薄膜(mo)過(guo)濾(lv)器(qi)(qi)。無(wu)菌檢查用的(de)濾(lv)膜(mo)孔徑應不大于0.45μm。直徑約為50mm。根據供試品及其溶(rong)劑的(de)特性選擇濾(lv)膜(mo)材質。抗生素供試品應選擇低(di)吸附的(de)濾(lv)器(qi)(qi)及濾(lv)膜(mo)。濾(lv)器(qi)(qi)及濾(lv)膜(mo)使(shi)用前應采用適宜的(de)方法滅菌。使(shi)用時，應保(bao)證濾(lv)膜(mo)在過(guo)濾(lv)前后的(de)完整性。

　　參考資料八：

　　對照試(shi)驗

　　1、陽性(xing)對(dui)照：一般情況(kuang)下，供(gong)試品(pin)無菌(jun)檢查若采(cai)用(yong)薄(bo)膜過濾法，應增加1/2的(de)最小(xiao)檢驗數量(liang)作(zuo)(zuo)陽性(xing)對(dui)照用(yong)；若采(cai)用(yong)直接接種法，應增加供(gong)試品(pin)無菌(jun)檢查時每(mei)個(ge)培養基容器(qi)接種的(de)樣(yang)品(pin)量(liang)作(zuo)(zuo)陽性(xing)對(dui)照用(yong)。

　　陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)對照(zhao)應(ying)根據供(gong)試(shi)品(pin)特性(xing)(xing)(xing)選擇陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)對照(zhao)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)：無(wu)(wu)抑菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)作用(yong)及抗(kang)(kang)革蘭陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)為主的(de)(de)供(gong)試(shi)品(pin)，以金(jin)黃色葡(pu)萄球菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)為對照(zhao)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)；抗(kang)(kang)革蘭陰性(xing)(xing)(xing)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)為主的(de)(de)供(gong)試(shi)品(pin)以大腸埃希(xi)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)為對照(zhao)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)；抗(kang)(kang)厭氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)供(gong)試(shi)品(pin)，以生(sheng)孢(bao)梭菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)為對照(zhao)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)；抗(kang)(kang)真菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的(de)(de)供(gong)試(shi)品(pin)，以白色念珠菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)為對照(zhao)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)。陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)對照(zhao)試(shi)驗(yan)的(de)(de)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)液(ye)制備(bei)同(tong)方法驗(yan)證(zheng)試(shi)驗(yan)，加菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)量(liang)小于(yu)100cfu，供(gong)試(shi)品(pin)用(yong)量(liang)同(tong)供(gong)試(shi)品(pin)無(wu)(wu)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)檢查每(mei)份培養(yang)基接(jie)種的(de)(de)樣品(pin)量(liang)。陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)對照(zhao)管(guan)培養(yang)48～72小時應(ying)生(sheng)長良好。

　　2、陰性對(dui)(dui)照(zhao)(zhao)：供試品無(wu)菌檢查時，應取(qu)相應溶劑和稀(xi)釋液(ye)、沖洗液(ye)同法(fa)操作(zuo)，作(zuo)為陰性對(dui)(dui)照(zhao)(zhao)。陰性對(dui)(dui)照(zhao)(zhao)不得有菌生長。

　　3、稀釋液(ye)、沖洗(xi)液(ye)及其制備方(fang)法

　　稀釋液(ye)(ye)、沖洗液(ye)(ye)配制(zhi)后應(ying)采用(yong)驗證合格的(de)滅菌程序滅菌。

　　（1）0.1%蛋白胨(dong)水(shui)溶液 取蛋白胨(dong)1.0g，加水(shui)1000ml，微溫溶解(jie)，濾清(qing)，調節pH值至7.1±0.2，分裝，滅(mie)菌。

　　（2）pH7.0 氯化(hua)鈉(na)(na)-蛋白(bai)胨緩沖(chong)液取磷酸二(er)氫鉀(jia)3.56g，磷酸氫二(er)鈉(na)(na)7.23g，氯化(hua)鈉(na)(na)4.30g，蛋白(bai)胨1.0g，加水1000ml，微溫溶解，濾清，分裝，滅菌。

　　（3）根據供試品的特性，可(ke)選用其他經驗(yan)證過的適宜(yi)的溶液作為稀釋液、沖洗液。

　　如需要(yao)，可在上述稀釋(shi)液或沖洗(xi)液的滅菌(jun)前(qian)或滅菌(jun)后加入表面活性劑(ji)或中和劑(ji)等。

　　參考資料九：

　　參考標(biao)準(zhun)

　　——《中華(hua)人民共和國藥典》

　　——GB/T14233.2《醫用輸液、輸血、注射(she)器具檢驗(yan)方(fang)法 第2部分生物學試驗(yan)方(fang)法》

　　——GB19489《實驗室 生物安(an)全通用要求》

　　——GB50346《生物安全實驗室(shi)建筑技術規范》

　　——GB/T16292～16294《醫藥工業潔凈室（區）懸浮粒(li)子、浮游菌和沉降菌的測試方法》

　　——ISO11737-2《醫療(liao)器(qi)械的(de)滅(mie)菌 微(wei)生(sheng)物方法 第2部分：滅(mie)菌過(guo)程定義、驗證和(he)保(bao)持中(zhong)的(de)無菌檢測》